Fanazavana ny teny fototra biolojia molekiola
1. cDNA sy cccDNA: ny cDNA dia ADN mitongilana roa voarafitra amin'ny transcriptase mivadika avy amin'ny mRNA;Ny cccDNA dia ADN boribory mihidy misy tady roa plasmid tsy misy krômôzôma.
2. Vondrona miforitra mahazatra: ny singa ara-drafitra faharoa proteinina α-helix sy β-sheet dia afaka mamorona sakana ara-drafitra miaraka amin'ny fandaminana geometrika manokana amin'ny alàlan'ny polypeptides mampifandray isan-karazany.Ity karazana famolahana tapa-kevitra ity dia matetika antsoina hoe rafitra super secondaire.Saika ny rafitra ambaratonga ambony rehetra dia azo faritana amin'ireo karazana miforitra ireo, ary na dia ireo karazana mitambatra aza, noho izany dia antsoina koa hoe singa miforitra mahazatra izy ireo.
3. CAP: cyclic adenosine monophosphate (cAMP) receptor proteinina CRP (cAMP receptor proteinina), ilay complex miforona taorian'ny fitambaran'ny cAMP sy CRP dia antsoina hoe proteinina activating CAP (cAMP activated protein).
4. Filaharana palindromika: Ny filaharana mifameno mifamadika amin'ny ampahany amin'ny sombiny ADN, matetika toerana anzima famerana.
5. micRNA: RNA interfering mifameno na RNA antisense, izay mifameno amin'ny filaharan'ny mRNA ary afaka manakana ny fandikana ny mRNA.
6. Ribozyme: RNA miaraka amin'ny hetsika catalytic, izay manana anjara asa autocatalytic amin'ny dingan'ny splicing ny ARN.
7. Motif: Misy faritra eo an-toerana manana endrika telo dimanjato mitovy sy topolojia amin'ny firafitry ny molekiola proteinina.
8. Peptide famantarana: peptide misy asidra amine 15-36 ao amin'ny N-terminus mandritra ny synthesis proteinina, izay mitarika ny transmembrane ny proteinina.
9. Attenuator: Filaharan'ny nucleotide eo anelanelan'ny faritra opérateur iray sy ny fototarazo ara-drafitra izay mamarana ny fandikana.
10. Toerana majika: Rehefa mitombo ny bakteria ary mifanena amin'ny tsy fahampian'ny asidra amino tanteraka, dia hamokatra valiny maika ny bakteria mba hampitsaharana ny fanehoana ny fototarazo rehetra.Ny mari-pamantarana miteraka an'io valinteny vonjy maika io dia guanosine tetraphosphate (ppGpp) sy guanosine pentaphosphate (pppGpp).Ny anjara asan'ny PpGpp sy pppGpp dia tsy operon iray na vitsivitsy ihany, fa misy fiantraikany amin'ny maro amin'izy ireo, noho izany dia antsoina hoe super-regulators na teboka majika.
11. Singa mpanentana ambony: manondro ny filaharan'ny ADN izay mitana anjara toerana ara-dalàna amin'ny asan'ny mpanentana, toy ny TATA ao amin'ny faritra -10, TGACA ao amin'ny faritra -35, enhancers, ary attenuators.
12. ADN probe: ampahany misy marika amin'ny ADN miaraka amin'ny filaharana fantatra, izay ampiasaina betsaka hamantarana ny filaharan'ny tsy fantatra sy ny fijerena ny fototarazo kendrena.
13. SD sequence: Io no filaharan'ny ribosome sy mRNA, izay mandrindra ny fandikana.
14. Antibody Monoclonal: Antibody izay miady amin'ny determinant antigène tokana ihany.
15. Cosmid: ADN exogenous vita artifisialy izy io izay mitazona ny faritra COS amin'ny tendrony roa amin'ny phage ary mifandray amin'ny plasmid.
16. Fandinihana ny tasy manga-fotsy: Ny fototarazo LacZ (encoding β-galactosidase), ny anzima dia afaka manimba ny substrate chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) mba hamokatra manga, ka mahatonga ny tebiteby ho manga.Rehefa ampidirina ny ADN exogenous, dia tsy azo aseho ny fototarazo LacZ, ary fotsy ny tebiteby, mba hijerena ny bakteria recombinant.Antsoina hoe screening manga-fotsy izany.
17. Singa Cis-acting: Filaharan'ny base manokana ao amin'ny ADN izay mandrindra ny fanehoana ny fototarazo.
18. Anzima Klenow: Sombiny lehibe amin'ny ADN polymerase I, afa-tsy hoe ny hetsika exonuclease 5' 3' dia nesorina tao amin'ny holoenzyme ADN polymerase I.
19. PCR vatofantsika: ampiasaina hanamafisana ny ADN mahaliana miaraka amin'ny filaharana fantatra amin'ny tendrony iray.Ny rambony poly-dG dia nampiana ny tendrony iray amin'ny filaharana tsy fantatra, ary avy eo ny poly-dC sy ny filaharana fantatra dia nampiasaina ho primer ho an'ny fanamafisana PCR.
20. Proteinina fusion: Ny fototarazon'ny proteinina eukaryotic dia mifandray amin'ny fototarazo exogenous, ary ny proteinina voaforon'ny fandikana ny proteinina fototarazo tany am-boalohany sy ny proteinina exogenous dia aseho amin'ny fotoana iray ihany.
Endrika ploraly an'ny teny biolojia molekula
1. Ny sarintany ara-batana amin'ny ADN dia ny filaharan'ny filaharana (restriction endonuclease-digested) sombiny amin'ny molekiola ADN.
2. Ny fizarazarana ny RNase dia mizara ho karazany roa (autocatalysis) sy (heterocatalysis).
3. Misy antony telo fanombohana ao amin'ny prokaryotes dia (IF-1), (IF-2) ary (IF-3).
4. Ny proteinina transmembrane dia mila tari-dalana (peptides famantarana), ary ny anjara asan'ny chaperones proteinina dia (manampy amin'ny famadihana ny rojo peptide amin'ny fampifanarahana ny proteinina).
5. Ny singa ao amin'ny mpanentana dia azo zaraina ho karazany roa amin'ny ankapobeny: (singa mpanentana fototra) sy (singa mpanentana ambony).
6. Ny votoatin'ny fikarohana momba ny biolojia molekiola dia ahitana ampahany telo indrindra: (biolojia molekiola ara-drafitra), (fanehoan-kevitra sy fandrindrana ny fototarazo), ary (teknolojia famerenana ny ADN).
7. Ny andrana roa lehibe mampiseho fa ny ADN no fototarazo dia ny (pneumococcus infection amin'ny totozy) sy (T2 phage infection amin'ny Escherichia coli).mety).
8. Misy fahasamihafana lehibe roa eo amin'ny hnRNA sy ny mRNA: (ny hnRNA dia mifamatotra amin'ny dingan'ny fiovam-po ho mRNA), (ny faran'ny 5' amin'ny mRNA dia ampiana amin'ny satroka m7pGppp, ary misy polyadenylation fanampiny amin'ny faran'ny 3' amin'ny rambony asidra mRNA (polyA).
9. Ny tombony amin'ny endriky ny proteinina multi-subunit dia (ny subunit dia fomba ara-toekarena amin'ny fampiasana ADN), (afaka mampihena ny fiantraikan'ny hadisoana kisendrasendra amin'ny synthesis proteinina amin'ny hetsika proteinina), (mety ho tena mahomby ny hetsika ary misokatra sy mihidy haingana).
10. Ny votoatin'ny proteinina folding mechanism voalohany amin'ny nucleation theory dia ahitana (nucleation), (fampivoarana ara-drafitra), (fanavaozana farany).
11. Ny galactose dia misy fiantraikany roa amin'ny bakteria;amin'ny lafiny iray (azo ampiasaina ho loharano karbônina ho an'ny fitomboan'ny sela);etsy ankilany (io koa dia singa iray amin'ny rindrin'ny sela).Noho izany, ny mpanentana tsy miankina amin'ny cAMP-CRP S2 dia ilaina ho an'ny synthesis maharitra amin'ny ambaratonga fototra;miaraka amin'izay koa, ilaina ny mpanentana S1 miankina amin'ny cAMP-CRP mba hifehezana ny synthesis avo lenta.Ny fandikana dia manomboka amin'ny (S2) misy G ary avy amin'ny (S1) tsy misy G.
12. Ny teknôlôjia ADN recombinant dia fantatra ihany koa amin'ny hoe (klonin'ny fototarazo) na (cloning molecular).Ny tanjona farany dia ny (hamindra ny ADN momba ny fototarazo amin'ny zavamananaina iray mankany amin'ny zavamananaina hafa).Ny andrana recombination ADN mahazatra matetika dia ahitana ireto dingana manaraka ireto: (1) Esory ny fototarazo kendrena (na ny fototarazo exogenous) amin'ny zavamananaina mpanome, ary ampifandraiso amin'ny enzymatique amin'ny molekiola ADN hafa (vector kloning) mba hamorona molekiola ADN recombinant vaovao.② Afindra ao amin'ny sela mpandray ny molekiola ADN recombinant ary averina ao amin'ny sela mpandray.Io dingana io dia antsoina hoe fiovana.③ Asehoy ary fantaro ireo sela mpandray izay nandray ny ADN recombinant.④Amboary betsaka ny sela misy ADN recombinant mba hamantarana raha miseho ny fototarazo fanampiana avy any ivelany.
13. Misy karazany roa ny replication plasmid: ireo izay fehezin'ny synthesis proteinina ao amin'ny sela mpampiantrano dia antsoina hoe (plasmids henjana), ary ireo izay tsy voafehin'ny synthesis proteinina selan'ny mpampiantrano dia antsoina hoe (plasmids miadana).
14. Ny rafitra fanehoan-kevitra PCR dia tokony hanana ireto fepetra manaraka ireto: a.ADN primers (fototra 20 eo ho eo) miaraka amin'ny filaharana mifameno amin'ny faran'ny tady roa amin'ny fototarazo kendrena ho sarahina.b.Enzymes manana fahamarinan-toerana mafana toy ny: TagDNA polymerase.c, dNTPd, filaharan'ny ADN mahaliana ho modely
15. Ny dingan'ny fanehoan-kevitra fototra amin'ny PCR dia misy dingana telo: (dénaturation), (fanalefahana), ary (fanitarana).
16. Ny dingana fototra amin'ny biby transgène dia matetika ahitana: ①Fampidirana ny fototarazo vazaha klônina ao amin'ny ivon'ny atody misy zezika na sela embryonika;②Fifindran'ny atody misy zezika na embryon embryon ao amin'ny tranonjaza vavy;③Fitomboana sy fitomboana feno embryon ho an'ny taranaka manana fototarazo vahiny;④ Ampiasao ireto biby afaka mamokatra proteinina avy any ivelany ireto ho tahiry fiompiana mba hiteraka tsipika homozygous vaovao.
17. Ny cellule Hybridoma dia azo avy amin'ny fikambanan'ny sela (spleen B) miaraka amin'ny sela (myeloma), ary satria (spleen cellule) dia afaka mampiasa hypoxanthine ary (sela taolana) dia manome asa fizarazarana sela, dia azo ambolena ao amin'ny HAT medium.mitombo.
18. Miaraka amin'ny halalin'ny fikarohana, ny taranaka voalohany amin'ny antibody dia antsoina hoe (antibody polyclonal), ny taranaka faharoa (antibody monoclonal), ary ny taranaka fahatelo (antibody engineering génétique).
19. Amin'izao fotoana izao, ny fototarazo ny otrik'aretina bibikely dia mifantoka indrindra amin'ny baculovirus, izay miseho amin'ny fampidirana ny (exogenous poizina fototarazo);( fototarazo manimba ny tsingerin'ny fiainan'ny bibikely);(fanovana ny fototarazo virosy).
20. Ny anton-javatra proteinina trans-acting mifanitsy amin'ny singa iraisana TATA, GC, ary CAAT ao amin'ny mpanentana RNA polymerase II mammalian dia (TFIID), (SP-1) ary (CTF / NF1), tsirairay avy.
iraika amby roapolo.Ny anton-javatra transcription fototra amin'ny RNA polymerase Ⅱ dia, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, ary ny filaharan'izy ireo dia: (D, A, B, E).Ny asan'ny TFII-D dia (mifatotra amin'ny boaty TATA).
roa amby roampolo.Ny ankamaroan'ny anton-javatra transcription izay mifatotra amin'ny ADN dia miasa amin'ny endrika dimer.Ny sehatra miasa amin'ny anton-javatra transcription izay mifatotra amin'ny ADN dia matetika ireto manaraka ireto (helix-turn-helix), (motif rantsantanana zinc), (basic-leucine) motif zipper.
telo amby roapolo.Misy karazany telo ny fomba faneriterena endonuclease fameperana: (tapaka eo amin'ny lafiny 5' amin'ny axe symmétrie mba hiteraka 5' faran'ny mipetaka), (tapaka eo amin'ny ilany 3' amin'ny axe symmétrie mba hamokatra 3' faran'ny mipetaka (tapaka amin'ny axe symmetry mba hamorona fizarana fisaka) ).
efatra amby roapolo.Ny ADN plasmid dia manana configura telo samy hafa: (Configuration SC), (configuration oc), (configuration L).Ny voalohany amin'ny electrophoresis dia (configuration SC).
25. Rafitra fanehoana fototarazo exogenous, indrindra indrindra (Escherichia coli), (Levure), (Insekta) ary (latabatra selan'ny biby mampinono).
26. Ny fomba fampiasa matetika ho an'ny biby transgène dia: (fomba fifindran'ny retroviral), (fomba microinjection ADN), (fomba cellule stem embryonic).
Fampiharana ny biolojia molekiola
1. Lazao ny asan'ny RNA mihoatra ny 5?
Famindrana RNA tRNA Famindrana asidra amino Ribosome RNA rRNA Ribosome dia mandrafitra iraka RNA mRNA Modely synthesis proteinina heterogène RNA hnRNA nokleary heterogène Mialoha ny mRNA matotra RNA nokleary kely snRNA Tafiditra ao amin'ny hnRNA splicing Ny cytoplasmic RNA scRNA/7SL-RNAnt proteinina Reticulum RNA/7SL-RNAnth proteinina Reticulum RNA kely sy RNA. RNA Mandrindra ny fanehoana ny fototarazo Ribozyme RNA Enzymatically active RNA
2. Inona no maha samy hafa ny prokaryotique sy ny eukaryotic?
Prokaryotic TTGACA --- TATAAT------International Site-35 -10 Eukaryotic Enhancer---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-Initiation Site-110 -70 -25
3. Inona avy ireo lafiny lehibe amin'ny fananganana artifisialy amin'ny plasmids voajanahary?
Ny plasmids voajanahary matetika dia misy lesoka, ka tsy mety ampiasaina ho mpitatitra amin'ny engineering génétique, ka tsy maintsy ovaina sy amboarina: a.Manampia fototarazo fanamarihan'ny fifantenana, toy ny roa na mihoatra, izay mora ampiasaina amin'ny fifantenana, matetika ny fototarazo antibiotika.b.Ampitomboy na ahena ny toerana fanapahana anzima sahaza mba hanamora ny famerenana indray.c.Hafohy ny halavany, tapaho ny sombintsombiny tsy ilaina, hanatsara ny fahombiazan'ny fanafarana ary hampitombo ny fahafahan'ny entana.d.Ovay ny dika mitovy, avy amin'ny tery mankany amin'ny malalaka, avy amin'ny vitsy kokoa ho maro kokoa.e.Ampio singa fototarazo manokana araka ny fepetra manokana momba ny injeniera génétique
4. Manomeza ohatra iray amin'ny fomba fanaovana fitiliana ny cDNA manokana momba ny sela?
Voaomana ny isan'ny sela roa, ny fototarazo kendrena dia aseho na tena aseho ao amin'ny iray amin'ireo sela, ary ny fototarazo kendrena dia tsy aseho na ambany ao amin'ny sela hafa, ary avy eo ny fototarazo kendrena dia hita amin'ny alàlan'ny hybridization sy ny fampitahana.Ohatra, mandritra ny fisehoan-javatra sy ny fivoaran'ny fivontosana, ny sela fivontosana dia hanolotra mRNA manana haavo fanehoana hafa noho ny sela mahazatra.Noho izany, ny fototarazo mifandraika amin'ny fivontosana dia azo jerena amin'ny alàlan'ny hybridization differential.Ny fomba fampidiran-dresaka dia azo ampiasaina koa hijerena ireo fototarazo misy ny fiteniny.
5. Famoronana sy fitiliana ny tsipika cellule hybridoma?
Spleen B sela + myeloma sela, ampio polyethylene glycol (PEG) mba hampiroboroboana sela fusion, ary ny splenic B-myeloma fusion sela mitombo ao amin'ny HAT medium (misy hypoxanthine, aminopterin, T) dia mitohy manitatra mamelona.Ny fusion cell dia ahitana: cellule fusion spleen-spleen: tsy afaka mitombo, tsy azo kolontsaina in vitro ny selan'ny spleen.Ny sela fusionan'ny taolana: tsy afaka mampiasa hypoxanthine, fa afaka mamorona purine amin'ny alàlan'ny lalana faharoa amin'ny fampiasana folate reductase.Aminopterin dia manakana ny folate reductase ka tsy afaka mitombo.Ny sela fusionan'ny taolana: afaka mitombo ao amin'ny HAT, ny cellules spleen dia afaka mampiasa hypoxanthine, ary ny selan'ny taolana dia manome asa fizarana sela.
6. Inona no fitsipika sy fomba hamaritana ny rafitra voalohany amin'ny ADN amin'ny alàlan'ny fomba famaranana terminal dideoxy (fomba Sanger)?
Ny fitsipika dia ny fampiasana terminator rojo nucleotide-2,,3,-dideoxynucleotide mba hampitsaharana ny fanitarana ny ADN.Koa satria tsy ampy ny 3-OH ilaina amin'ny fananganana fatorana 3/5/phosphodiester, rehefa tafiditra ao anatin'ny rojo ADN, dia tsy azo itarina bebe kokoa ny rojo ADN.Araka ny fitsipiky ny fampiraisana fototra, isaky ny mila dNMP ny polymerase ADN mba handray anjara amin'ny rojo ADN miitatra ara-dalàna, dia misy safidy roa, ny iray dia ny mandray anjara amin'ny ddNTP, izay miteraka ny fampitsaharana ny fanitarana rojo deoxynucleotide;ny iray kosa dia ny fandraisana anjara amin'ny dNTP , mba hahafahan'ny rojo ADN mbola miitatra mandra-pidirana ny ddNTP manaraka.Araka io fomba io, dia azo alaina ny vondron'ny sombintsombin'ny ADN amin'ny halavany samihafa miafara amin'ny ddNTP.Ny fomba dia ny mizara ho vondrona efatra tsirairay avy ddAMP, ddGMP, ddCMP, ary ddTMP.Aorian'ny fanehoan-kevitra, ny electrophoresis gel polyacrylamide dia afaka mamaky ny filaharan'ny ADN araka ny tarika milomano.
7. Inona no fiantraikan'ny fifehezana tsara ny proteinina activator (CAP) amin'ny fandikana?
Cyclic adenylate (cAMP) receptor proteinina CRP (cAMP receptor proteinina), ny complex miforona amin'ny fitambaran'ny cAMP sy CRP dia antsoina hoe CAP (cAMPactivated proteinina).Rehefa mitombo ny E. coli amin'ny salantsalany tsy misy glucose, dia mitombo ny synthesis ny CAP, ary ny CAP dia manana ny asan'ny activating promoters toy ny lactose (Lac).Ny sasany amin'ireo mpanentana miankina amin'ny CRP dia tsy manana ny endri-javatra mahazatra -35 faritra (TTGACA) izay ananan'ny mpanentana mahazatra.Noho izany, sarotra ho an'ny RNA polymerase ny mamatotra azy.Ny fisian'ny CAP (asa): afaka manatsara be ny fatoran'ny enzyme sy ny mpanentana.Izany indrindra dia mampiseho ireto lafiny roa manaraka ireto: ① CAP dia manampy ny molekiola anzima hitodika tsara amin'ny fanovana ny conformation ny mpanentana sy ny fifandraisana amin'ny anzima, mba hitambatra amin'ny faritra -10 ary mitana ny anjara asan'ny fanoloana ny asan'ny faritra -35.②CAP dia afaka manakana ny fatoran'ny RNA polymerase amin'ny toerana hafa ao amin'ny ADN, ka mampitombo ny mety hidirany amin'ny mpanentana manokana azy.
8. Inona avy no dingana matetika tafiditra ao anatin'ny andrana rekombinan'ny ADN?
a.Esory ny fototarazo kendrena (na ny fototarazo exogenous) amin'ny zavamananaina mpanome, ary ampifandraiso amin'ny molekiola ADN hafa (vector kloning) mba hamorona molekiola ADN recombinant vaovao.b.Alefaso ao amin'ny sela mpandray ny molekiola ADN recombinant ary avereno indray ary tehirizo ao amin'ny sela mpandray.Io dingana io dia antsoina hoe fiovana.c.Asio ary fantaro ireo sela mpandray izay nandray ny ADN recombinant.d.Kolontsaina faobe ny sela misy ny ADN recombinant hamantarana raha aseho ny fototarazo fanampiana avy any ivelany.
9. Fananganana trano famakiam-bokin'ny fototarazo Fomba telo amin'ny fitiliana ny recombinant no omena ary nofaritana fohy ny fizotrany.
Fandinihana ny fanoherana ny antibiotika, ny tsy fihetsehan'ny fanoherana, ny fitiliana tasy manga-fotsy na ny fitiliana PCR, ny fitiliana tsy mitovy, ny fitiliana ADN Ny ankamaroan'ny vector kloning dia mitondra fototarazo fanoherana antibiotika (anti-ampicillin, tetracycline).Rehefa afindra ao amin'ny Escherichia coli ny plasmid dia hahazo fanoherana ny bakteria, ary tsy hanana fanoherana ireo tsy misy famindrana.Tsy afaka manavaka anefa na efa nalamina na tsia.Ao amin'ny vector misy fototarazo fanoherana roa, raha ampidirina ao anatin'ny iray amin'ireo fototarazo ny sombintsombiny ADN vahiny ka mahatonga ny fototarazo tsy hihetsika, dia azo ampiasaina ny fanaraha-maso takelaka roa misy zava-mahadomelina samihafa mba hijerena ireo recombinant tsara.Ohatra, ny plasmid pUC dia misy ny fototarazo LacZ (encoding β-galactosidase), izay afaka manimba ny substrate chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) mba hamokatra manga, ka mamadika ny manga.Rehefa ampidirina ny ADN vahiny, dia tsy azo aseho ny fototarazo LacZ, ary fotsy ny tebiteby, mba hijerena ny bakteria recombinant.
10. Hazavao ny dingana fototra amin'ny fahazoana biby transgène amin'ny alalan'ny selan'ny embryon?
Ny sela embryonika (ES) dia sela embryonika mandritra ny fivoaran'ny embryonika, izay azo kolokoloina amin'ny fomba artifisialy sy mihamitombo ary manana asa manavaka ireo sela hafa.Kolontsainan'ny sela ES: Mitokana sy kolontsaina ny habetsahan'ny sela anaty ao amin'ny blastocyst.Rehefa kolokoloina ao anaty sosona tsy misy famatsiana ny ES dia hiavaka amin'ny sela miasa isan-karazany toy ny sela hozatra sy sela N.Rehefa kolontsaina amin'ny fitaovana misy fibroblasts, ny ES dia mitazona ny fiasan'ny fanavahana.Ny ES dia azo ovaina amin'ny fototarazo, ary ny fiasan'ny fanavahana azy dia azo ampidirina tsy misy fiantraikany amin'ny fiasan'ny fanavahana, izay mamaha ny olan'ny fampidirana kisendrasendra.Ampidiro ny fototarazo exogenous ao anatin'ny cellule stem embryonic, avy eo ampidiro ao amin'ny tranon'ny totozy vehivavy bevohoka, mivoatra ho pups, ary miampita mba hahazoana totozy homozygous.
