1: Soloy ara-potoana ny fitaovana andrana

Amboary ny fanaraha-maso ratsy (NTC) ary avereno imbetsaka.Rehefa hita fa misy fandotoana ny vokatra PCR ao amin'ny laboratoara, dia soloy ara-potoana ny fitaovana andrana rehetra.Toy ny hoe: avereno amboarina sy omanina ny primer, sterilize indray ny tendron'ny pipette, tube EP, ddH2O, sns, soloina pipette vaovao, ary mindrana laboratoara vonjimaika hanaovana andrana PCR.Ny laboratoara voapoizina dia tokony halefa amin'ny rivotra sy taratra amin'ny taratra ultraviolet mandra-pahafoana ny fahalotoan'ny vokatra PCR alohan'ny handehanana amin'ny andrana.

2: Ampitomboy ny fotoana fiposahan'ny UV

Tsara ny manamarika fa mba hanesorana ny fandotoana ADN, ny taratra ultraviolet tsy tapaka dia tokony hanitatra ora 2 noho ny mahazatra.Na izany aza, mbola tsy tsara ny fiantraikan'ny taratra UV amin'ny fanesorana ny sombintsombiny kely (ambany 200bp) amin'ny fandotoana ADN.

Amin'ny ankapobeny dia 254/300nm ny halavan'ny onjan'ny taratra ultraviolet (nm), ary ampy ny mandrehitra mandritra ny 30 minitra.Tsara homarihina fa rehefa misafidy UV mba hanafoanana ny fandotoana ny vokatra PCR sisa, dia tokony hojerena ny halavan'ny vokatra PCR sy ny fizarana fototra amin'ny filaharan'ny vokatra.Ny taratra UV dia tsy mahomby afa-tsy amin'ny ampahany lava mihoatra ny 500 bp, ary tsy dia misy fiantraikany amin'ny sombintsombiny fohy.

Mandritra ny taratra UV, ny fototry ny pyrimidine ao amin'ny vokatra PCR dia hamorona dimer.Ireo dimer ireo dia afaka manafoana ny fanitarana, fa tsy ny pyrimidines rehetra ao amin'ny rojo ADN dia afaka mamorona dimer, ary ny taratra UV dia afaka manapaka ny dimer ihany koa..Ny haavon'ny fananganana dimer dia miankina amin'ny halavan'ny onjam-pandrefesana UV, ny karazana dimer pyrimidine ary ny filaharan'ny nucleotides mifanakaiky amin'ny toerana dimer.Noho izany, raha kely ny sombintsombin'ny PCR amplified, dia soso-kevitra ny hampiasa ny UNG anti-PCR rafitra fandotoana vokatra.

3: Fampiasana fandotoana ADN matetika

Ny aerosol dia mora azo rehefa ampiana pipettes, izay sarotra ialana, ary hilamina haingana.Noho izany, tsy isalasalana fa safidy tsara ny mampiasa matetika ireo mpihinana fandotoana ADN manokana mba hisorohana ny fiparitahan'ny fandotoana ADN.

4: Mampiasà rafitra manohitra ny fandotoana UNG

Aorian'ny fanesorana ny fandotoana ny vokatra PCR, ny laboratoara fitiliana dia afaka mampiasa ny rafitra fandotoana vokatra UNG anti-PCR mba hisorohana ny fandotoana ny vokatra PCR.Amin'ny laboratoara amin'ny ankapobeny, azonao atao ny manatanteraka fizarana andrana tsotra, manasaraka tanteraka ny faritra vokatra PCR amin'ny faritra hafa, mametraka fitsipika sy fitsipika momba ny laboratoara, ary manao fiofanana mifandraika amin'izany mba hisorohana ny fisian'ny fandotoana ny vokatra PCR.

Soso-kevitra: Ny fametrahana laboratoara PCR mitombina, ny fitazonana ny tontolo iainana PCR tsara, ny famolavolana ny fomba fiasa PCR mahazatra, ary ny fambolena ny fahatsiarovan-tena henjana ataon'ireo mpanandrana no fanalahidy hisorohana na hampihenana ny fandotoana ny andrana PCR.