Ny fahaverezan'ny fihainoana (HL) no aretina fahasembanana mahazatra indrindra amin'ny olombelona.Any amin’ny tany mandroso, eo amin’ny 80% eo ho eo amin’ny trangan’ny marenina eo amin’ny fiteny eo amin’ny ankizy dia vokatry ny fototarazo.Ny mahazatra indrindra dia ny tsy fahampian'ny fototarazo tokana (araka ny aseho ao amin'ny sary 1), ny fiovan'ny fototarazo 124 dia hita fa misy ifandraisany amin'ny fihenan'ny fihainoana tsy misy soritr'aretina amin'ny olombelona, ​​​​ny sisa dia vokatry ny tontolo iainana.Ny implant cochlear (fitaovana elektronika napetraka ao amin'ny sofina anatiny izay manome fanentanana elektrika mivantana amin'ny nerveo auditory) no safidy mahomby indrindra amin'ny fitsaboana HL mahery, raha ny fitaovana fandrenesana (fitaovana elektronika ivelany izay manova sy manamafy ny onjam-peo) dia afaka manampy ireo marary manana HL antonony.Na izany aza, tsy misy fanafody azo ampiasaina amin'ny fitsaboana ny HL (GHL) manaranaka.Tato anatin'ny taona vitsivitsy, ny fitsaboana fototarazo dia nitombo ny sain'ny olona ho fomba iray mampanantena hitsaboana ny tsy fahampian'ny sofina anatiny.

sary 1.Fizarana karazana fiovaovana mifandraika amin'ny marenina.[1]

Vao haingana, ny mpahay siansa avy ao amin'ny Salk Institute sy ny Oniversiten'i Sheffield dia namoaka valim-pikarohana momba ny Molecular Therapy - Methods & Clinical Development [2], izay naneho ny fahatsinjovana ny fampiharana ny fitsaboana génétique in vivo amin'ny marenina manaranaka.Uri Manor, mpampianatra mpikaroka mpanampy ao amin'ny Salk Institute ary talen'ny Waitt Center for Advanced Biophotonics, dia nilaza fa teraka tamin'ny fahaverezan'ny fandrenesana mafy izy ary nahatsapa fa ny famerenana ny fandrenesana dia ho fanomezana mahafinaritra.Ny fikarohana nataony teo aloha dia nahita fa ny Eps8 dia proteinina mifehy ny actin miaraka amin'ny hetsika famatorana sy fametahana aktin;Ao amin'ny sela volo cochlear, ny proteinina complexe noforonin'ny Eps8 miaraka amin'ny MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 ary GNAI3 dia misy indrindra indrindra Ny toro-hevitra amin'ny stereocilia lava, izay miaraka amin'ny MYO15A dia mametraka ny BAIAP2L2 amin'ny tendron'ny stereocilia fohy kokoa, ilaina amin'ny fikojakojana ny volo.Noho izany, ny Eps8 dia afaka mandrindra ny halavan'ny stereocilia amin'ny sela volo, izay tena ilaina amin'ny fandrenesana ara-dalàna;Ny famafana na ny fiovan'ny Eps8 dia hitarika ho amin'ny stereocilia fohy, izay mahatonga azy tsy afaka mamadika tsara ny feo ho famantarana elektrika ho an'ny fahitan'ny atidoha, izay mitarika ho amin'ny marenina..Nandritra izany fotoana izany, ny mpiara-miasa Walter Marcotti, mpampianatra ao amin'ny Oniversiten'i Sheffield, dia nahita fa tsy afaka mivoatra ara-dalàna ny sela volo raha tsy misy ny Eps8.Ao anatin'ity fanadihadiana ity, i Manor sy Marcotti dia niara-niasa mba hanadihady raha afaka mamerina ny asany ny fampidirana Eps8 amin'ny cellules stereociliary ary manatsara ny fihainoana ny totozy.Ny ekipa mpikaroka dia nampiasa ny adeno-associated virus (AAV) vector Anc80L65 mba hanaterana ny filaharan'ny kaody misy EPS8 karazana bibidia ao amin'ny cochlea an'ny Eps8-/- zaza vao teraka P1-P2 amin'ny alàlan'ny tsindrona membrane varavarankely;ao amin'ny selan'ny volon'ny cochlear totozy Ny asan'ny stereocilia dia namboarina talohan'ny fahamatorana;ary ny vokatry ny fanamboarana dia nampiavaka ny teknolojian'ny sary sy ny fandrefesana ny stereocilia.Ny valiny dia naneho fa ny Eps8 dia nampitombo ny halavan'ny stereocilia ary namerina ny fiasan'ny sela volo amin'ny sela ambany.Hitan’izy ireo koa fa, rehefa nandeha ny fotoana, dia toa tsy afaka nanavotra ireo sela ireo tamin’ny alalan’io fitsaboana fototarazo io.Ny dikan'izany dia mety mila atao ao anaty tranon-jaza io fitsaboana io, satria ny sela volo Eps8-/- dia mety efa matotra na nanangona fahasimbana tsy azo amboarina taorian'ny nahaterahan'ny totozy."Ny Eps8 dia proteinina manana fiasa maro samihafa, ary mbola betsaka ny tokony hojerena," hoy i Manor.Ny fikarohana ho avy dia ahitana ny fanadihadiana ny fiantraikan'ny fitsaboana fototarazo Eps8 amin'ny famerenana amin'ny laoniny ny fihainoana amin'ny dingan'ny fivoarana samihafa, ary raha azo atao ny manalava ny fotoana fitsaboana.Kisendrasendra, tamin'ny Novambra 2020, ny Profesora KarenB Avraham ao amin'ny Oniversiten'i Tel Aviv any Israely dia namoaka ny valiny tao amin'ny diary EMBO Molecular Medicine [3], tamin'ny fampiasana teknolojia fitsaboana fototarazo manavao mba hamoronana virus AAV9-PHP tsy misy dikany.B, Ny tsy fahampian'ny fototarazo ao amin'ny selan'ny volon'ny Syne4-/- totozy dia namboarina tamin'ny alàlan'ny fampidirana viriosy mitondra ny filaharan'ny kaody an'ny Syne4 ao amin'ny sofina anatiny amin'ny totozy, mamela azy hiditra ao amin'ny sela volo ary mamoaka ny fitaovana génétique entina, mamela azy ireo ho matotra sy miasa ara-dalàna (toy ny ao amin'ny sary 2).

Sary2.Fanehoan-kevitra momba ny anatomie sofina anatiny, miaraka amin'ny fifantohana amin'ny organ Corti sy ny fiasan'ny sela nesprin-4.

Hita fa ny fampiasana ny fitsaboana ny fototarazo mba hahatratrarana ny tanjona amin'ny fitsaboana aretina manaranaka amin'ny ambaratongan'ny fototarazo amin'ny alàlan'ny fampidirana, fanesorana na fanitsiana ny fototarazo mutated ho fitsaboana (izany hoe ny fifehezana ny fiovan'ny fototarazo amin'ny aretina) dia misy fiantraikany ara-pitsaboana avo lenta.fanantenana fampiharana.Ny fomba fitsaboana fototarazo amin'izao fotoana izao ho an'ny marenina tsy ampy fototarazo dia azo zaraina amin'ireto sokajy manaraka ireto:

fanoloana fototarazo

Ny fanoloana fototarazo dia azo lazaina fa fomba fitsaboana "mahitsy" indrindra amin'ny fitsaboana fototarazo, mifototra amin'ny famantarana sy fanoloana fototarazo misy kilema amin'ny dika mitovy amin'ny fototarazo ara-dalàna.Fandinihana fitsaboana fototarazo ao anaty sofina voalohany mahomby amin'ny fahaverezan'ny sofina vokatry ny famafana ny fototarazo vesicular glutamate transporter 3 (VGLUT3);AAV1-mediated fanaterana ny exogenous VGLUT3 overexpression amin'ny atiny sofina volo sela (IHCs) Mety hitarika ho amin'ny fandrenesana maharitra fanarenana, ampahany amin'ny ribbon synaptic morphology fanarenana, ary ny convulsive valiny [4].Na izany aza, amin'ireo ohatra ahitana ny fanoloana fototarazo roa aterina AAV voalaza ao amin'ny teny fampidirana etsy ambony, dia zava-dehibe ny manamarika fa ny maodelin'ny totozy ampiasaina amin'ny karazana famafazana fototarazo sasany dia tsy mitovy amin'ny olombelona, ​​​​ary amin'ny totozy P1, ny sofina anatiny dia eo amin'ny dingana matotra amin'ny fampandrosoana.Mifanohitra amin'izany, ny olombelona dia teraka manana sofina anatiny matotra.Io fahasamihafana io dia manakana ny fampiharana ny valin'ny totozy amin'ny fitsaboana ny aretin'ny marenina nateraky ny olombelona raha tsy hoe omena ny sofin'ny totozy efa matotra.

Fanovana Gene: CRISPR/Cas9

Raha ampitahaina amin'ny "fanoloana fototarazo", ny fivoaran'ny teknolojia fanovana fototarazo dia nitondra ny fiandohan'ny fitsaboana ny aretina avy amin'ny fototarazo.Ny tena zava-dehibe, ny fomba fanovana ny fototarazo dia mameno ny tsy fahampian'ny fomba fitsaboana fototarazo nentim-paharazana izay tsy mety amin'ny aretina marenina manaranaka, ary ny olana izay tsy maharitra ela ny fomba fanehoana tafahoatra.Taorian'ny nandrodanan'ny mpikaroka Shinoa manokana ny allele mutant Myo6C442Y tao amin'ny totozy Myo6WT / C442Y tamin'ny fampiasana ny rafitra fanovana fototarazo AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2, ary tao anatin'ny 5 volana taorian'ny knockout, ny totozy dia naverina tamin'ny laoniny ny fiasan'ny auditory ny modely;Tamin'izany fotoana izany, dia voamarika ihany koa fa nihatsara ny taham-pahaveloman'ny sela volo ao amin'ny sofina anatiny, nanjary tsy tapaka ny endriky ny cilia, ary nahitsy ny famantarana electrophysiologique [5].Ity no fianarana voalohany eto amin'izao tontolo izao mampiasa ny teknolojia CRISPR/Cas9 amin'ny fitsaboana ny marenina manaranaka vokatry ny fiovan'ny fototarazo Myo6, ary fandrosoana fikarohana lehibe momba ny teknolojia fanovana fototarazo ho an'ny fitsaboana ny marenina manaranaka.Ny fandikana klinika momba ny fitsaboana dia manome fototra siantifika mafy orina.

Fomba fanaterana génétique

Mba hahombiazan'ny fitsaboana fototarazo, ny molekiola ADN miboridana dia tsy afaka miditra amin'ny sela amin'ny fomba mahomby noho ny hydrophilicity sy ny fiampangana ratsy amin'ny vondrona phosphate, ary mba hiantohana ny fahamendrehan'ny molekiola asidra nokleika fanampiny, dia tsy maintsy mifidy fomba azo antoka sy mahomby.Ny ADN fanampiny dia alefa any amin'ny sela na sela kendrena.Ny AAV dia ampiasaina betsaka ho toy ny fiara fitaterana amin'ny fitsaboana aretina noho ny fiantraikany mahery vaika, ny immunogenicity ambany, ary ny tropisme midadasika amin'ny karazana sela isan-karazany.Amin'izao fotoana izao, vondron'asa fikarohana marobe no namaritra ny tropisma amin'ny karazana AAV samihafa mifandraika amin'ny karazana sela samihafa ao amin'ny cochlea totozy.Ny fampiasana ny toetran'ny fanaterana AAV miaraka amin'ny mpanentana manokana amin'ny sela dia mety hahatratra ny fitenenana manokana amin'ny sela, izay mety hampihena ny vokatra tsy lasibatra.Ho fanampin'izany, ho solon'ny vectors AAV nentim-paharazana, ny vectors AAV synthetic vaovao dia novolavolaina tsy an-kijanona ary mampiseho fahaiza-manao transduction ambony ao amin'ny sofina anatiny, izay AAV2/Anc80L65 no be mpampiasa indrindra.Ny fomba fanaterana tsy viriosy dia azo zaraina bebe kokoa amin'ny fomba ara-batana (microinjection sy electroporation) sy ny fomba simika (miorina amin'ny lipida, mifototra amin'ny polymère, ary nanoparticles volamena).Ireo fomba roa ireo dia nampiasaina tamin'ny fitsaboana ny aretin'ny marenina manaranaka ary naneho tombony sy fetra samihafa.Ho fanampin'ny fiara fitaterana ho an'ny fitsaboana fototarazo ho toy ny fiara, ny fomba fiasa samihafa amin'ny fitantanana ny fototarazo in vivo dia azo ampiasaina mifototra amin'ny karazana sela kendrena samihafa, ny lalan'ny fitantanana ary ny fahombiazan'ny fitsaboana.Ny firafitry ny sofina anaty dia sarotra ny manatratra ireo sela kendrena ary miadana ny fitsinjarana ireo fitaovana fanovana genome.Ny labyrinth membranous dia hita ao anatin'ny labyrinth taolana amin'ny taolana temporal ary ahitana ny lakandrano cochlear, lakandrano semicircular, utricle ary balaonina.Ny fitokana-monina misy azy, ny fiverimberenan'ny lymphatika kely indrindra, ary ny fisarahana amin'ny rà amin'ny alàlan'ny sakana maze-dra dia mametra ny fandefasana rafitra mahomby amin'ny fitsaboana amin'ny totozy zaza vao teraka.Mba hahazoana titer viriosy mety amin'ny fitsaboana fototarazo, dia ilaina ny fampidirana mivantana ireo virosy virosy eo an-toerana amin'ny sofina anatiny.Ny lalan'ny tsindrona napetraka dia ahitana [6]: (1) fonon-baravarankely boribory (RWM), (2) tracheostomie, (3) cochleostomy endolymphatic na perilymphatic, (4) fonon-baravarankely boribory miampy fenestration Tube (CF) (toy ny ao amin'ny sary 3).

Fig3.Fanaterana ny fitsaboana fototarazo anaty sofina.

Na dia maro aza ny fandrosoana natao tamin'ny fitsaboana fototarazo, mifototra amin'ny tanjon'ny fandikana klinika, dia mila asa bebe kokoa alohan'ny hahatongavan'ny fitsaboana amin'ny fototarazo ho safidy fitsaboana voalohany ho an'ny marary voan'ny aretina ara-pananahana, indrindra amin'ny fampandrosoana ny vectors azo antoka sy mahomby ary fomba fandefasana.Saingy mino izahay fa tsy ho ela, ireo karazana fitsaboana ireo dia ho lasa fototry ny fitsaboana manokana ary hisy fiantraikany tsara eo amin'ny fiainan'ny olona manana aretina ara-pananahana sy ny fianakaviany.

Foregene koa dia namoaka kitapo fitiliana avo lenta ho an'ny fototarazo lasibatra, izay haingana ary afaka manao transcription mivadika sy fanehoan-kevitra qPCR tsy misy fitrandrahana RNA.

Product Links

Kit RT-qPCR Cell Direct—Taqman/SYBR GREEN I

Raha mila fanazavana fanampiny momba ny vokatra dia mifandraisa amin'ny:

overseas@foregene.com