Mino aho fa ny olona rehetra dia hiatrika olana toy izany na toy izany foana rehefa manao PCR fanehoan-kevitra, fa ny ankamaroan'izy ireo dia azo sokajiana ho olana roa lehibe:

Kely loatra ny fanamafisam-peo amin'ny fototarazo (fanamafisana);
Fanamafisana fototarazo tsy kendrena loatra.
Ny fampiasana additives dia iray amin'ireo paikady mahazatra hamahana ireo olana ireo.Matetika ny anjara asan'ny additives dia manana lafiny roa:
rafitra faharoany fototarazo (firafitry ny faharoa);
Ampidino ny priming tsy voafaritra.
Androany, ny tonian-dahatsoratra dia hampahafantatra anao fohifohy ny additives mahazatra amin'ny fihetsiky ny PCR sy ny asany.
Additives izay mampihena ny rafitra faharoa
sulfoxide(DMSO)
santionan'ny fototarazomisy votoaty GC ambony .Na izany aza, ny DMSO dia mampihena be ny hetsika Taq polymerase.Noho izany, ny tsirairay dia tsy maintsy mandanjalanja ny fidirana amin'ny môdely sy ny asan'ny polymerase.Manoro hevitra ny tonian-dahatsoratra fa afaka manandrana fifantohana samihafa amin'ny DSMO ianao, toy ny 2% ka hatramin'ny 10%, mba hahitana ny fifantohana mifanaraka amin'ny fanandramanao.
Fanadiovana tsy ionika
Ny fanadiovana tsy misy ionika, toy ny 0.1-1% Triton X-100, Tween 20 na NP-40, dia matetika mampihena ny rafitra faharoa ADN.Na dia mety hampitombo ny fampitomboana ny fototarazo aza izany, dia hiteraka olana amin'ny fanamafisana tsy voafaritra ihany koa izany.Noho izany, ireo additives ireo dia miasa tsara amin'ny fanehoan-kevitry ny PCR tsy misy fako, fa tsy dia tsara loatra amin'ny fanehoan-kevitra PRC maloto.Ny tombony hafa amin'ny fanadiovana tsy misy ionika dia ny fampihenana ny fandotoana SDS.Matetika mandritra ny dingan'ny fitrandrahana ADN, ny SDS dia entina amin'ny dingana PCR, izay manakana be ny asan'ny polymerase.Noho izany, ny fampidirana 0.5% Tween-20 na Tween-40 amin'ny fanehoan-kevitra dia afaka manala ny voka-dratsin'ny SDS.
Betaine_
Betaine dia afaka manatsara ny fanamafisana ny ADN amin'ny alàlan'ny fampihenana ny fananganana rafitra faharoa ary amin'ny ankapobeny dia "mistery" fanampiny amin'ny kitapo PCR ara-barotra.Raha te hampiasa betaine ianao dia tokony hametraka betaine na betaine mono-hydrate (Betaine na Betaine mono-hydrate), fa tsy betaine hydrochloride (Betaine HCl), ampifanaraho amin'ny fifantohana farany amin'ny 1-1.7M.Betaine dia afaka manampy amin'ny fanatsarana ny spécialité satria manafoana ny fiankinan'ny fiankinan-doha amin'ny fiankinan-doha amin'ny fanalefahana ADN/dénaturation ADN.
Additives hampihenana ny priming tsy voafaritra
Formamide
Formamide dia additive PCR organika mahazatra.Afaka mitambatra amin'ny groove lehibe sy groove kely ao amin'ny ADN izy io, ka mampihena ny fahamarinan'ny master ADN double helix ary mampihena ny mari-pana mitsonika ny ADN.Ny fifantohan'ny formamide ampiasaina amin'ny fanandramana PCR dia matetika 1% -5%.
Tetramethylklôro ammonium( TMAC)
Tetramethylammonium klôro dia afaka mampitombo ny specificity ny hybridization (hybridization specificity) ary mampitombo ny mari-pana mitsonika ny ADN.Noho izany, ny TMAC dia afaka manala ny priming tsy voafaritra ary mampihena ny tsy famatorana ny ADN sy ny ARN.Raha mampiasa ianaodegenerate primersamin'ny fanehoan-kevitra PCR, tadidio ny manampy TMAC, izay matetika ampiasaina amin'ny fifantohana 15-100mM.
Fanampiny mahazatra hafa
Ankoatra ireo sokajy roa fanampiny voalaza etsy ambony, dia misy additives mahazatra maro amin'ny fanehoan-kevitry ny PCR, na dia samy manana ny asany aza izy ireo, dia tena zava-dehibe ihany koa.
Ion manezioma
Ny ion magnésium dia cofactor (cofactor) tena ilaina amin'ny polymerase, izany hoe, raha tsy misy ion magnesium, ny polymerase dia tsy miasa.Na izany aza, ny ion magnesium be loatra dia mety hisy fiantraikany amin'ny fahombiazan'ny polymerase.Ny fifantohan'ny ion manezioma isaky ny fihetsiky ny PCR dia hiovaova.Chelating agents (toy ny EDTA na citrate), ny fifantohan'ny dNTP sy ny proteinina dia misy fiantraikany amin'ny fifantohan'ny ion magnesium.Noho izany, raha manana olana amin'ny fanandramana PCR ianao dia azonao atao ny manandrana manova ny fifantohana ion magnesium samihafa, ohatra, avy amin'ny 1.0 ka hatramin'ny 4.0mM, miaraka amin'ny elanelana 0.5-1mM eo anelanelany.
Tsara ny manamarika fa ny tsingerin'ny fampangatsiahana maro dia mety hitarika amin'ny stratification ny fifantohana amin'ny vahaolana magnesium chloride.Noho izany, dia tsy maintsy levona tanteraka alohan'ny fampiasana tsirairay, ary afangaro tsara alohan'ny fampiasana azy.
Bovine serum albumin(Bovine albumin, BSA)
Ao amin'ny andrana simia molekiola, bovine serum albumin dia fanampin-javatra mahazatra, indrindra amin'ny fandevonan-kanina faneriterena sy ny fanandramana PCR.Amin'ny fanehoan-kevitry ny PCR, BSA dia manampy amin'ny fampihenana ny loto toy ny phenolic compounds.Ary voalaza ihany koa fa afaka mampihena ny adhesion ny reactants amin'ny rindrin'ny fantsona.Amin'ny fanehoan-kevitra PCR, matetika ny fifantohana amin'ny BSA fanampiny dia mety hahatratra 0.8 mg / ml.
 
Vokatra mifandraika:
PCR Hero(miaraka amin'ny loko)
PCR Hero