Ny PCR mivantana dia fanehoan-kevitra izay mampiasa mivantana ny vatan'ny biby na zavamaniry mba hanamafisana tsy misy fitrandrahana asidra nokleika.Amin'ny lafiny maro, ny PCR mivantana dia miasa toy ny PCR mahazatra

Ny tena maha samy hafa dia ny fomba amam-panao buffer ampiasaina amin'ny mivantana PCR, ny santionany dia azo iharan'ny mivantana PCR fanehoan-kevitra tsy misy nucleic asidra fitrandrahana, fa misy mifanaraka amin'ny fepetra takiana amin'ny fandeferana ny anzima sy ny mifanaraka ny buffer tafiditra ao amin'ny mivantana PCR fanehoan-kevitra.

Na dia betsaka kokoa na latsaka ny PCR inhibitors amin'ny santionany mahazatra, ny PCR mivantana dia mbola afaka mahatratra ny fanamafisana azo antoka eo ambanin'ny fihetsiky ny enzymes sy buffers.Ny fihetsiketsehan'ny PCR nentim-paharazana dia mitaky asidra nokleika avo lenta ho modely, izay mety hanakana ny fivoaran'ny fihetsiky ny PCR raha toa ka misy proteinina sy loto hafa ilay môdely.Direct PCR dia iray amin'ireo teknolojia malaza indrindra amin'ny sehatry ny diagnostika molekiola.

01 Direct PCR dia nampiasaina tamin'ny biby sy zavamaniry tany am-boalohany

Ny fampiharana voalohany amin'ny PCR mivantana dia eo amin'ny sehatry ny biby sy ny zavamaniry, toy ny rà, ny tavy ary ny volon'ny voalavo, saka, akoho, bitro, ondry, omby, sns., Ravinkazo sy voa, sns., ampiasaina amin'ny fandalinana genotyping, transgenic, plasmid detection, Gene knockout analysis, ADN loharano famantarana, karazana famantarana, SNP fanadihadiana sy ny saha hafa.

Ireo saha ireo dia manana endri-javatra mahazatra, izany hoe, ny votoatin'ny fototarazo kendrena dia somary avo ary ny fitrandrahana asidra nokleika dia manahirana, ka ny PCR mivantana dia tsy afaka mamonjy fotoana fotsiny ary misy fiantraikany kely amin'ny vokatra, fa mitahiry ny vidiny.

Ny PCR mivantana ampiasaina amin'ny fitadiavana pathogen dia raharaha tato anatin'ny taona vitsivitsy, ny mpanamboatra PCR reagent sasany dia nanao ezaka be tamin'io lalana io rehefa nanao fanavaozana.Indrindra amin'ity valan'aretina COVID-19 ity, maro ny vokatra fitiliana toy izany no niseho eny an-tsena, toy ny SARS-CoV-2 Nucleic Acid Detection Kit (Multiplex PCR Fluorescent Probe Method) nokarohina sy novolavolain'i Foregene, izay mampiasa teknolojia RT PCR Real-time (rRT-PCR) ho an'ny fitiliana qualitative ny SARS-CoV-2 amin'ny santionany nasopharyngeal nasopharyngeal olombelona.

Foregene dia iray amin'ireo orinasa mampiasa teknolojia Direct PCR, mba hamantarana ny ORF1ab mahazatra, N, E, aryvariana dia miteraka asidra nokleika amin'ny santionany swab nasopharyngeal na oropharyngeal olombelona toy ny SARS-CoV-2 B.1.1.7 (UK), B.1.351 (ZA), B.1.617 (IND) ary P.1 (BR).

02  Reagents ilaina amin'ny PCR mivantana

Ohatra Lysate

Ny lysate santionany dia azo amboarina ho anao na novidina.Ny fahasamihafan'ny firafitry ny marika lysate samihafa dia hahatonga ny fahaiza-manaon'ny lysing ho hafa, ary ny fotoana lysing dia ho hafa kely.Ohatra, ho an'ny fanomanana santionany amin'ny tavy biby, 30 minitra na lysis mandritra ny alina no soso-kevitra amin'ny ankapobeny, ary ny vahaolana lysis ho an'ny viriosy dia eo amin'ny 3-10 minitra.

PCR master mix

Amporisihina ny mampiasa polymerase ADN manomboka mafana mba hanamafisana ny fanamafisana manokana sy hampitombo ny fahaiza-manamafy.Ny fototry ny PCR mivantana dia polymerase tena mahazaka.

Esory na manakana ny singa ao amin'ny santionany izay misy fiantraikany amin'ny fanamafisana ny ADN

Aorian'ny fikarakarana ny santionany miaraka amin'ny lysate, ny proteinina, ny lipida ary ny potipoti-javatra hafa dia havoaka, ireo akora ireo dia hanakana ny fihetsiky ny PCR.Noho izany, ny PCR mivantana dia mitaky ny fanampin'ny fanesorana na ny inhibitor mifanaraka amin'izany mba hampihenana ny fiantraikan'ireo anton-javatra ireo.

03  Fanangonana hevitra dimy momba ny PCR mivantana

Voalohany, ny teknolojia Direct PCR dia teknolojia PCR mivantana ho an'ny santionany biolojika isan-karazany.Amin'ity toe-javatra ara-teknika ity dia tsy ilaina ny manasaraka sy manala ny asidra nokleika, mampiasa mivantana ny santionan'ny sela ho toy ny zavatra, ary ampio ny fototry ny fototarazo kendrena hanao ny fihetsiky ny PCR.

Faharoa, ny teknolojia Direct PCR dia tsy teknolojia fanamafisam-peo mahazatra ADN ihany, fa misy ihany koa ny PCR transcription mivadika RNA.

Fahatelo, ny teknolojia Direct PCR dia tsy vitan'ny hoe mivantana mivantana amin'ny PCR qualitative fanehoan-kevitra amin'ny sela santionany, fa misy ihany koa ny Real-Time qPCR fanehoan-kevitra, izay mitaky ny rafitra fanehoan-kevitra mba manana mahery anti-background fluorescence interference fahaiza-manao sy endogenous fluorescence quenchers ny antagonistic fahaiza-manao.

Fahefatra, ny santionany nokendrena amin'ny teknolojia Direct PCR dia mila ny famoahana ireo lasitra asidra nokleika, ary tsy manala proteinina, polysaccharides, sira, sns izay manelingelina ny fihetsiky ny PCR.Izay mitaky ny polymerase asidra nokleary sy ny PCR Mix ao amin'ny rafitra fanehoan-kevitra mba hanana fanoherana tsara sy adaptability mba hiantohana ny asan'ny anzima sy ny replication marina ao anatin'ny toe-javatra sarotra.

Fahadimy, ny santionany amin'ny tavy lasibatra amin'ny teknolojia Direct PCR tsy misy fitsaboana asidra nokleika ary kely dia kely ny habetsaky ny môdely, izay mitaky ny rafitra fanehoan-kevitra mba hanana fahatsapana avo lenta sy fahombiazana amin'ny fanamafisana.