Mametraka SOP andrana PCR hanara-penitra ny fihetsiky ny mpiasan'ny andrana.
Manaja tanteraka ny fomba fiasa ny mpanandrana, ary manamaivana ny fandotoana PCR izay mety ateraky ny olombelona na manakana ny fisian'ny loto.Ankoatr'izay, ny mpanandrana dia tokony hanana fahalalana sy fahaiza-manao matihanina mifanaraka amin'izany, ao anatin'izany ny fahaizana mampiasa fitaovana mifandraika amin'izany, manazava ny fizotran'ny asa manontolo, mahafehy ny fomba fitsaboana ny fandotoana sy ny fomba fanaraha-maso ny kalitaon'ny laboratoara, ary afaka mandika tsara ny valin'ny fitsapana.
Manangana laboratoara PCR manara-penitra.
Ny laboratoara PCR dia mizara ho faritra efatra amin'ny foto-kevitra, dia ny faritra fanomanana reagent, faritra fanodinana santionany, faritra fanamafisam-peo, ary faritra famakafakana vokatra fanamafisam-peo.Ny faritra roa voalohany dia faritra mialoha ny fanamafisam-peo, ary ny faritra roa farany dia faritra aorian'ny fanamafisam-peo.Ny faritra mialoha ny fanamafisam-peo sy ny faritra aorian'ny fanamafisam-peo dia tokony hosarahina tsara.Ny fitaovana fanandramana, ny reagents, ny taratasy firaketana, ny penina, ny fitaovana fanadiovana, sns., dia tsy afaka mikoriana afa-tsy avy amin'ny faritra mialoha ny fanamafisam-peo mankany amin'ny faritra aorian'ny fanamafisam-peo, izany hoe avy amin'ny faritra fanomanana reagent → faritra fanodinana santionany → faritra fanamafisam-peo → faritra famakafakana vokatra fanamafisam-peo, ary tsy tokony hihemotra.Ny fikorianan'ny rivotra ao amin'ny laboratoara koa dia tokony hivoaka avy amin'ny faritra mialoha ny fanamafisana mankany amin'ny faritra aorian'ny fanamafisam-peo, fa tsy mihemotra.Ny endrika tsara indrindra amin'ny laboratoara PCR dia aseho eto ambany:
Sary A: Fomba fanamboarana laboratoara PCR tsara indrindra miaraka amin'ny fanerena ratsy ao amin'ny efitrano buffer
Sary B: Fomba fanamboarana laboratoara PCR tsara indrindra miaraka amin'ny fanerena tsara ao amin'ny efitrano fitehirizana
Ny kisary fananganana laboratoara PCR omena ao amin'ny sary A sy ny sary B dia tokony ho fomba fanamboarana tsara kokoa, ary ny laboratoara manana fepetra dia afaka manondro io fomba io ho an'ny famolavolana.Ho an'ny laboratoara tsotra dia asaina misaraka ny faritra fanamafisam-peo PCR sy ny faritra famakafakana ny vokatra, ary ny fanokafana ny fonony dia tokony hahena araka izay azo atao ao amin'ny faritra fanomanana santionany sy ny faritra amplification PCR.Tsarovy: Ny vokatra sy ny fitaovana andrana ao amin'ny faritra famakafakana ny vokatra dia voarara tanteraka tsy entina any amin'ny faritra fanomanana santionany sy faritra fanamafisam-peo PCR.
Raha manao fitiliana sy famantarana PCR ihany ny laboratoara, dia soso-kevitra ny hampiasa PCR fluorescent quantitative fa tsy PCR mahazatra.
Ny valin'ny fitiliana PCR fluorescence quantitative dia azo angonina sy dinihana amin'ny alàlan'ny famantarana fluorescence, noho izany dia tsy ilaina ny manokatra ny sarony ho an'ny electrophoresis aorian'ny fanehoan-kevitra, izay misoroka ny fandotoana ny vokatra PCR vokatry ny fivoahan'ny vokatra fanehoan-kevitra mba hamoronana aerosol.Raha ampitomboinao ny isan'ny fisokafan'ny satroka mandritra ny dingana famenoana ny electrophoresis gel, dia mety hitranga ny fandotoana aerosol.Amporisihina ny hampiroborobo ny fampiharana ny PCR quantitative ary manolo tsikelikely ny PCR qualitative.
Ny rafitra fandotoana vokatra UNG manohitra ny PCR dia ampiasaina amin'ny fanehoan-kevitry ny PCR.
Ny rafitra dia mampiasa dUTP fa tsy dTTP.Aorian'ny fihetsiketsehan'ny PCR dia ampidirina amin'ny dUTP ny vokatra PCR rehetra (sombiny ADN);Amin'ny fihodinana manaraka amin'ny fihetsiketsehan'ny PCR, ny anzima UNG ampidirina ao amin'ny rafitra dia atsipazo ao amin'ny 37 ° C mandritra ny 5 minitra alohan'ny PCR, izay mety hanimba manokana ny sombintsombin'ny ADN rehetra misy dUTP, ary avy eo dia manao fihetsika PCR.Afaka manala tanteraka ny loto aerosol ateraky ny vokatra PCR izany.Ny vokany dia aseho amin'ny sary etsy ambany:
Fanamarihana: Ho an'ny andian-dahatsoratra PCR mivantana, azonao atao ny misafidy ny vokatra andiany amin'ny rafitra fandotoana vokatra manohitra ny PCR an'ny Foregenesoso-kevitra
Ho an'ny laboratoara manao fitiliana genotyping midadasika, dia aroso mafy ny mampiasa ny rafitra fandotoana vokatra UNG manohitra ny PCR ho an'ny fitiliana reagents ho fanampin'ny fananganana laboratoara mety.
Fampahatsiahivana: Ny fampiasana an'ity rafitra ity dia tsy afaka manala ny fahalotoan'ny vokatra PCR izay efa naterak'izany.Noho izany, ny rafitra UNG dia tokony hampiasaina amin'ny fiandohan'ny fitsapana mifandraika, ary ny rafitra UNG dia tokony hampiasaina amin'ny fanamafisana PCR, mba hisorohana ny fandotoana ny vokatra PCR False positive.
Amporisihina ny hampiasa ny rafitra Direct PCR-UNG an'ny Foregene rehefa manao fitiliana lehibe, toy ny:
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；
Kit PCR mivantana voan-javamaniry-UNG；
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；
Mouse Rambo Direct PCR Kit-UNG；
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Ity andiana kitapo avy amin'ny Foregene ityTsy vitan'ny hoe manao fitiliana PCR haingana sy amin'ny ambaratonga lehibe ihany koa, fa misoroka sy mifehy ny fandotoana ny vokatra PCR.
Fotoana fandefasana: Mar-19-2021
