Tao anatin'ny folo taona lasa, ny teknolojia fanovana fototarazo mifototra amin'ny CRISPR dia nivoatra haingana, ary nampiharina tamim-pahombiazana tamin'ny fitsaboana ny aretina sy ny homamiadana amin'ny fitsapana klinika olombelona.Mandritra izany fotoana izany, ny mpahay siansa eran'izao tontolo izao dia mampiasa fitaovana vaovao tsy tapaka miaraka amin'ny mety hanovana fototarazo mba hamahana ny olan'ny fitaovana fanovana fototarazo sy fanapahan-kevitra efa misy.

Tamin'ny volana septambra 2021, namoaka taratasy tao amin'ny gazety Siansa [1] ny ekipan'i Zhang Feng, ary nahita fa ny transposter isan-karazany no nanao kaody anzima asidra nucleic RNA ary nomena anarana hoe rafitra Omega (anisan'izany ny ISCB, ISRB, TNP8).Hitan'ny fandinihana ihany koa fa ny rafitra Omega dia mampiasa ampahany amin'ny ARN mba hitarihana ny rojo roa ADN, izany hoe ωRNA.Ny tena zava-dehibe dia kely dia kely ireo anzima asidra nokleika ireo, eo amin'ny 30% eo ho eo amin'ny CAS9, izay midika fa mety halefa any amin'ny sela izy ireo.

Tamin'ny 12 Oktobra 2022, ny ekipan'i Zhang Feng dia namoaka tao amin'ny gazety Nature mitondra ny lohateny hoe: Structure of the Omega Nickase ISRB in Complex with ωrna and Target DNA [2].

Ny fandinihana dia nandinika bebe kokoa ny firafitry ny mikroskopika elektronika mangatsiaka an'ny ISRB-ωRNA sy ny komplex ADN kendrena ao amin'ny rafitra Omega.

ISCB no razamben'ny CAS9, ary ny ISRB dia mitovy amin'ny tsy fahampian'ny domaine asidra nokleika HNH an'ny ISCB, noho izany dia kely kokoa ny habeny, 350 eo ho eo fotsiny ny asidra amine.Ny ADN koa dia manome fototra ho an'ny fampandrosoana bebe kokoa sy ny fiovan'ny injeniera.

Ny IsrB tarihin'ny RNA dia mpikambana ao amin'ny fianakaviana OMEGA voahodidin'ny fianakaviamben'ny transposon IS200/IS605.Avy amin'ny famakafakana phylogenetic sy fizarana sehatra tsy manam-paharoa, ny IsrB dia mety ho mpialoha lalana ny IscB, izay razamben'ny Cas9.

Tamin'ny Mey 2022, ny laboratoara Lovely Dragon ao amin'ny Cornell University dia namoaka taratasy tao amin'ny diary Science [3], famakafakana ny firafitry ny IscB-ωRNA sy ny mekanika manapaka ny ADN.

Raha ampitahaina amin'ny IscB sy Cas9, IsrB dia tsy manana ny sehatra HNH nuclease, ny REC lobe, ary ny ankamaroan'ny sehatra mifandraika amin'ny filaharana PAM, noho izany ny IsrB dia kely kokoa noho ny Cas9 (eo amin'ny 350 amino asidra fotsiny).Na izany aza, ny haben'ny IsrB kely dia mandanjalanja amin'ny RNA mpitari-dalana somary lehibe (ny omega RNA dia eo amin'ny 300 nt ny halavany).

Ny ekipan'i Zhang Feng dia nandinika ny rafitra mikraoskaopy cryo-electron an'ny IsrB (DtIsrB) avy amin'ny bakteria anaerobika mando-hafanana Desulfovirgula thermocuniculi sy ny complexe ny ωRNA sy ny ADN kendrena.Ny fanadihadiana ara-drafitra dia naneho fa ny firafitry ny proteinina IsrB amin'ny ankapobeny dia nizara rafitra taolam-paty tamin'ny proteinina Cas9.

Fa ny mahasamihafa azy dia ny Cas9 dia mampiasa ny REC lobe mba hanamorana ny fanekena ny tanjona, raha ny IsrB kosa dia miantehitra amin'ny ωRNA-ny, ny ampahany amin'izany dia mamorona rafitra telo-dimensional be pitsiny izay miasa toy ny REC.

Mba hahatakarana bebe kokoa ny fiovan'ny rafitry ny IsrB sy Cas9 nandritra ny evolisiona avy amin'ny RuvC, ny ekipan'i Zhang Feng dia nampitaha ireo rafitra mamatotra ADN amin'ny RuvC (TtRuvC), IsrB, CjCas9 ary SpCas9 avy amin'ny Thermus thermophilus.

Ny famakafakana ara-drafitra an'ny IsrB sy ny ωRNA dia manazava ny fomba iarahan'ny IsrB-ωRNA sy ny fametahana ny ADN lasibatra, ary manome fototra ho an'ny fampandrosoana bebe kokoa sy ny injeniera amin'ity nuclease kely ity.Ny fampitahana amin'ny rafitra hafa tarihin'ny RNA dia manasongadina ny fifandraisana miasa eo amin'ny proteinina sy ny RNA, izay mampandroso ny fahatakarantsika ny biolojia sy ny fivoaran'ireo rafitra samihafa ireo.

Rohy:

1.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abj6856

2.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abq7220

3.https://www.nature.com/articles/s41586-022-05324-6