Hatraiza no fantatrao

Momba an'i Nfitrandrahana asidra ucleic

Ny fiandohana sy ny fiafaran'ny asidra nokleika voadio

Sarotra ny zava-drehetra amin'ny voalohany, ny asidra nokleika voadio no betsaka indrindra

Fanombohana ny fanandramana molekiola, ho an'ny fanandramana manaraka

Misy fiantraikany lehibe ny fahombiazana na ny tsy fahombiazana.

Ny trace/ultra-trace UV spectrophotometer dia tian'ny mpikaroka siantifika maro satria afaka mamantatra ny fifantohana amin'ny asidra nukleika sy ny proteinina ary ny sira ion ambioka tsotra, haingana ary ara-toekarena.

Araka ny fantatsika rehetra, A260 dia midika hoe asidra nucleic absorbance OD sanda, A280 midika proteinina absorbance OD sanda, A230 midika sira ion fifantohana absorbance OD sanda, ka A260 dia afaka manova ny nucleic asidra fifantohana, A260/280 midika proteinina sisa, A260/230 midika sira ion sisa tavela amin'ny, fa ny fikarohana ihany no mandrefy ny isan'ny fitsipika, fa ny fikarohana ihany no refesina.mahazatra” mba hinoana fa afaka manazava ny fahadiovan’ny ADN sy ARN izy iofetra iray.Tsy io ihany no fenitra hamantarana ny vokatra sy ny fahadiovana amin'ny asidra nokleika, fa ampiasaina ho fanondroana fotsiny, ary tsy "standard volamena".

Ny boky Thermo Fisher ND-2000 dia manantitrantitra ny fahamendrehan'ny valin'ny fitsapana

Ny antony dia ny vokatra azo tamin'ny fampiasana micro/ultramicro UV spectrophotometer afa-tsy ny vokatra sy ny fahadiovan'ny nucleic asidra avy amin'ny lafiny, ary misy fiantraikany maro lafin-javatra (lalana optique, santionany habetsahan'ny, santionany fifantohana, pH sandan'ny, ion hafa izay misy fiantraikany absorbance fandrefesana, sns), ny refesina OD sanda dia tsy voatery ho marina.Mandritra izany fotoana izany, noho ny tsy fisian'ny specificity ny absorbance sandan'ny fanapahan-kevitra ara-nofo, tokana-stranded ADN, roa-stranded ADN, RNA, dNTPs, ary ny proteinina sasany dia samy manana absorption tampon'isa amin'ny onjam-260nm, ary ny fifantohana voafaritry ny A260 irery dia tsy voatery ho ny tena ADN na ARN.Tsy azo tsaraina ny fifantohana sy ny fahamarinany ary ny fahasimbany.

Ahoana àry no hitsarana ny kalitaon'ny asidra nokleika voadio?Ho fanampin'ny fampiasana spectrophotometer UV micro/ultramicro mba hamantarana, dia ilaina ihany koa ny fomba toy ny electrophoresis gel agarose mba hampisehoana ny fahadiovana sy ny fahamendrehan'ny asidra nokleika, ary hanondro ny fifantohana amin'ny lafiny iray.Amin'izany fomba izany, ny vokatra azo avy amin'ny asidra nokleika sy ny fahadiovana azo avy amin'ny valin'ny fikarohana amin'ny fomba isan-karazany dia azo itokisana.

Fampitahana tabilao andrana

Ny ADN génomika an'ny sela H1299 dia nalaina tamin'ny alàlan'ny kitapom-pamokarana ADN an'ny orinasa A, ary hita ny fahalotoan'ny fahalotoana lehibe, ka niteraka sanda OD ambony.

(Sanda fandrefesana OD sy electropherogram mifanaraka aminy)

Fanombanana fanombanana

Misy "fenitra volamena" ho an'ny vokatra asidra nokleika sy fitsapana kalitao ve?

Raha ny fantatra dia tsy misy fomba tsotra sy haingana ary mora.Na spectrophotometer, electrophoresis gel, na spectrometry faobe, izy rehetra dia maneho ny fifantohana sy ny fahadiovan'ny asidra nokleika amin'ny vahaolana amin'ny lafiny samihafa, ary mila tsaraina amin'ny fifampiresahana izy ireo.

Ny tondro fanombanana tsara indrindra dia foanany fampiharana andrana manaraka.Tsy misy fiantraikany amin'ny fahombiazan'ny transcription mivadika sy ny fanamafisana PCR izany.Ny fahazoana vokatra fanamafisam-peo azo itokisana sy ny sanda Ct, ary ny fahazoana filaharana feno amin'ny alàlan'ny filaharana dia ny fitrandrahana asidra nokleika mahomby.

Raha fintinina, ny fomba fijery momba ny teôlôjian'ny ratio-only dia tokony ho toherina amin'ny fomba fijery hoe "mampiasa vokatra andrana tsara any ambany ho toy ny masontsivana fitrandrahana tsara"!

Kitapo fitrandrahana RNA ADN Foregene naroso mba hahazoana fahadiovana ADN/RNA avo lenta:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/