Inona no atao hoe vaksiny mRNA
Ny vaksinin'ny mRNA dia mamindra ny RNA mankany amin'ny selan'ny vatana mba hanehoana sy hamokatra antigène proteinina aorian'ny fanovana mifandraika amin'ny vitro, ka mitarika ny vatana hamokatra valim-panafody manohitra ny antigène, ka manitatra ny hery fiarovan'ny vatana.[1,3].
Sary 1: Diagrama skéma momba ny vokatry ny tsindrona mivantana ny vaksiny mRNA [2]
Fanasokajiana ny vaksiny mRNA
Ny vaksiny mRNA dia mizara ho karazany roa:tsy mamerinamRNA arymampitombo ny tenamRNA: ny mRNA manamafy ny tenany dia tsy vitan'ny hoe manodinkodina ny antigène kendrena, fa mamadika koa ny replication izay ahafahana mampitombo ny RNA intracellular sy ny mekanika fanehoana proteinina.Ny vaksinin'ny mRNA tsy mi-replicating afa-tsy ny antigène kendrena ary misy faritra 5' sy 3' tsy voadika (UTR).Izy ireo dia manome fanentanana feno amin'ny fampifanarahana sy ny hery fiarovana voajanahary, izany hoe ny fanehoana antigène in situ sy ny fampitana famantarana loza, ary manana ireto fampiharana manaraka ireto.[2,3]
●Afaka manome fanentanana feno amin'ny fampifanarahana sy ny hery fiarovana voajanahary, izany hoe fanehoana antigène in situ sy fampitana famantarana loza.
●Afaka mamporisika ny hery fiarovana "mandanjalanja", ao anatin'izany ny humoural sy ny cellules ary ny fahatsiarovana ny hery fiarovana
●Afaka manambatra ny antigène samihafa nefa tsy mampitombo ny fahasarotan'ny famolavolana vaksiny
●Ny fanatsarana tsy tapaka ny hery fiarovana dia azo tanterahina amin'ny alàlan'ny vaksiny miverimberina, ary tsy misy na kely ny valin'ny hery fiarovana amin'ny mpitatitra.
●Ny vakisiny mRNA tsy miovaova dia afaka manamora ny fitaterana sy ny fitahirizana ny vaksiny
Sary 2: Diagrama skematika momba ny vaksiny mRNA sy ny mekanika fanehoana antigène [4]
Toetran'ny vaksiny mRNA
Raha ampitahaina amin'ny vaksiny nentim-paharazana, ny vaksinin'ny mRNA dia manana dingana famokarana tsotra, haingam-pampandrosoana haingana, tsy mila kolontsaina sela ary mora vidy.Raha ampitahaina amin'ny vaksiny ADN, ny vaksinin'ny mRNA dia tsy mila miditra ao amin'ny nucleus ary tsy misy atahorana ny fampidirana ao amin'ny genome host.Ny antsasaky ny fiainana dia azo ahitsy amin'ny fanovana.
Table 1: Ny tombony sy ny tsy fahampian'ny vaksiny mRNA
|
| tombony | toetra izy |
| vaksiny mRNA | Fikarohana sy fampandrosoana haingana, 40 andro monja ny famokarana vaksiny | Miteraka valim-panafody tsy ilaina
|
| Ny tsy fandriam-pahalemana mRNA amin'ny toe-javatra ara-batana, mora simba | Tsy hiditra ao amin'ny génome mba hisorohana ny fiovan'ny fitsaboana mety
| |
| Tsy mila signal localization nokleary, transcription | Mbola tsy maintsy hamarinina ny fahombiazan'ny nokleary fiarovana
|
Sary 3: Sarin'ny fizotry ny famokarana sy fanomanana ny vaksiny mRNA [4]
Foregene Viral RNA Isolation kit
RT-qPCR mora (dingana iray)
Paikady nohatsaraina amin'ny fanomanana vaksiny mRNA
Noho ny faharatsian'ny mRNA mihitsy, ny fahapotehan'ny nucleases amin'ny tavy, ny fahombiazan'ny fidirana amin'ny sela ambany, ary ny fahombiazan'ny fandikana ambany, ireo lesoka ireo dia mametra ny fampiharana ny vaksiny mRNA.Mitana anjara toerana lehibe koa ny fahombiazan'ny fandikan-teny.Ny fiara fitaterana dia azo zaraina ho virosy virosy sy tsy virosy (anisan'izany ny liposomes, non-liposomes, viriosy, nanoparticles, sns.).Noho izany dia ilaina ny fepetra fanatsarana mifandraika amin'izany.Ity manaraka ity dia paikady fanatsarana pharmacologique amin'ny fanomanana mRNA[2]
1 Mamorona analogies cap na mampiasa enzymes capping mba hanamafisana ny mRNA sy hampitombo ny fandikana proteinina amin'ny alàlan'ny fatorana amin'ny eukaryotic translation initiation factor 4E (EIF4E)
2 Ampifanaraho ireo singa ao amin'ny faritra 5′-tsy voadika (UTR) sy 3′-UTR mba hanamafisana ny mRNA sy hampitombo ny fandikana proteinina
3 Ny fampidirana rambo poly(A) dia afaka mampitombina ny mRNA sy mampitombo ny fandikana proteinina
4 Nucleoside novaina mba hampihenana ny fampahavitrihana ny hery fiarovana ary hampitombo ny fandikana
5 Ny fitsaboana amin'ny RNase III sy ny fanadiovana chromatography ranoka proteinina haingana (FPLC) dia mety hampihena ny fampahavitrihana ny hery fiarovana ary hampitombo ny fandikana.
6 Amboary ny filaharana na kaody mba hampitomboana ny fandikan-teny
7 Fanaterana miaraka amin'ireo anton-javatra fanombohana fandikan-teny sy fomba hafa hanovana ny fandikana sy ny immunogenicity
Sary 4: Ny famokarana mRNA amin'ny vitro transcription (IVT) sy ny fizotry ny fanangonana [5]
Fanomanana lehibe ny ADN plasmid
Ny fanadiovana ADN plasmid dia manaisotra indrindra ny loto toy ny RNA, ny endotoxine ADN mivelatra, ny proteinina mpampiantrano ary ny asidra nokleika mpampiantrano, ary matetika no manova ny plasmid recombinant ho E. coli.Ny E. coli dia mandalo fermentation avo lenta, avy eo misaraka amin'ny ranomandry, ary manangona E. coli.Ny E. coli avy eo dia iharan'ny lysis alkaline, ny fisarahana amin'ny rano mivaingana centrifugal ary ny fanazavana mikrofiltration aorian'ny lysis, ny ultrafiltration ary ny fifantohana aorian'ny fanazavana, ary avy eo ny fanadiovana chromatography.
Fanadiovana ny ADN plasmid:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, et al.Vaksin'ny mRNA - vanim-potoana vaovao amin'ny vaksiny [J].Fanadihadiana momba ny zava-mahadomelina, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Fampidirana ny vakoka RNA.Ao amin'ny: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G , Zhang C , Li J , et al.mRNA ho teknolojia manovaova ho an'ny fampandrosoana ny vaksiny hifehezana ny areti-mifindra [J].Molecular Therapy, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, , Manamboatra vaksinin'ny mRNA mba handanjalanjana ny valin-kafatra voajanahary voajanahary / adaptive, fironana amin'ny fitsaboana molekiola, Boky 26, laharana 3,2020, pejy 311-323.
Fotoana fandefasana: Aug-05-2021
