Ny tahan'ny ambany A260 / A230 dia matetika vokatry ny loto miaraka amin'ny halavan'ny onjam-pandrefesana ambony indrindra amin'ny 230nm.Andeha hojerentsika hoe inona ireo loto ireo:

• Fandotoana mahazatra	Ny halavan'ny onjam-pandrefesana	Effet ratio
  proteinina	~ 230nm sy 280nm	Ny fihenan'ny A260/A 280ary A260/A 280ratios
  Guanidine sira	220-240 nm	Ampidino ny A260/A 280ISAKY NY
  Phenol	~270nm	-
  Trizol	~ 230nm sy 270nm	Ampidino ny A260/A 280ISAKY NY
  EDTA	~230nm	Ampidino ny A260/A 280ISAKY NY
  Ethanol	230-240 nm	Ampidino ny A260/A 280ISAKY NY

 
 
 
Ny halavan'ny onjam-pitrandrahana sy ny sanda mifanohitra amin'ny loto mahazatra

Pfandotoana roteina
Ny fandotoana proteinina dia azo raisina ho toy ny loto mahazatra indrindra amin'ny dingan'ny fitrandrahana asidra nokleika.Misy proteinina eo anelanelan'ny dingana ambony sy ambanyvoajanaharydingana .Ny fandotoana dia hampihena ny tahan'ny A260/A280 sy A260/A230 miaraka, ary ny tahan'ny A260/A230 dia hiova mazava kokoa noho ny tahan'ny A260/A280.
Nandritra ny manarakatranscription mivadikaor fanehoan-kevitra qPCR, Ny sisa tavela amin'ny proteinina dia mety manakana na manelingelina ny fiasan'ny enzyme.Ny fomba tsara indrindra hialana amin'ny fandotoana proteinina dia ny mitadidy ny fitsipiky ny "fa kely noho ny mihoatra, kely imbetsaka" rehefa mitsangatsangana ny supernatant.

2. Fandotoana Guanidinium
Ny hydrochloride (GuHCl) sy ny guanidine thiocyanate (GTC) dia manana ny fiantraikan'ny denaturing proteinina, izay mety hanimba haingana ny fonon'ny sela mandritra ny dingan'ny fitrandrahana asidra nokleary, ka miteraka proteinina denaturation sy rotsak'orana.Ny halavan'ny onjam-pandrefesana ny GuHCl sy GTC dia eo anelanelan'ny 220-240 nm, ary nyNy sira guanidinium sisa dia hampihena ny tahan'ny A260 / A230.Na dia mampihena ny tahan'ny sira guanidinium sisa tavela aza,ny fiantraika amin'ny andrana midina dia tena tsinontsinona.

3. Fandotoana Trizol
Ny singa fototra amin'ny Trizol dia phenol.Ny tena anjara asan'ny phenol dia ny lyse sela sy ny famoahana ny proteinina sy ny asidra nukleika ao amin'ny sela.Na dia afaka manafoana tsara ny proteinina aza ny phenol, dia tsy afaka manakana tanteraka ny asan'ny RNase.Noho izany, ny 8-hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, sns dia ampiana amin'ny TRIzol mba hanakanana ny endogenous sy exogenous RNase.
Rehefa maka RNA sela, Trizol dia afaka lyse haingana ny sela ary manakana ny nuclease navoaka avy amin'ny sela, ary ny sisa Trizol dia hampihena be ny tahan'ny A260/A230.
Fomba fanodinana: Rehefa centrifuging dia tsy maintsy marihina fa ny phenol ao amin'ny Trizol dia mora levona amin'ny dingan'ny rano eo ambanin'ny fepetra 4 ° sy ny mari-pana amin'ny efitrano.

4. Ny sisa tavela amin'ny ethanol
Ethanol dia ampiasaina amin'ny dingana farany mba handrodanana ny ADN ary handrava ny ion-tsira izay mety mifatotra amin'ny ADN.Ny halavan'ny onjam-pandrefesana ambony indrindraabsorption peak nyNy ethanol koa dia eo amin'ny 230-240 nm, izayhampihena ny tahan'ny A260/A230 ihany koa.
Ny fomba hisorohana ny ethanol sisa dia azo averina indroa mandritra ny elution farany, mitsoka ao amin'nysatroka setrokamandritra ny roa minitra mba hamelana ny ethanol ho etona tanteraka alohan'ny hampidirana buffer ho an'ny elution.
Na izany aza, tokony ho fantatra fa ny tahan'ny dia fanondroana fanombanana ny kalitaon'ny ARN.Raha fehezina mafy ireo asa voalaza etsy ambony ireo, dia tsy hisy fiatraikany lehibe amin'ny andrana midina ny fivilian-dàlana eo amin'ny tahan'ny sy ny salan'isa mahazatra.
Vokatra mifandraika:
Fitaovana fitokana-monina RNA Total Animal
Fitaovana fitokana-monina RNA Total
Kitapo Isolation RNA Total Cell
Plant Total RNA Isolation Kit Plus