Ny fikambanana dia mitazona ny foto-kevitra momba ny fomba "fitantanana ara-tsiansa, kalitao avo lenta ary laharam-pahamehana, mpividy ambony indrindra ho an'ny China Manufacturer for 2 × Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U.
Ny fikambanana dia mitazona ny foto-kevitra momba ny fomba fiasa "fitantanana siantifika, kalitao avo lenta ary laharam-pahamehana, mpividy ambony indrindra amin'nyChina Taq DNA Polymerase sy Qpcr, Ny orinasanay dia manana tanjaka be dia be ary manana rafitra tambajotra varotra tsy tapaka sy tonga lafatra.Maniry izahay fa afaka mametraka fifandraisana ara-barotra tsara amin'ny mpanjifa rehetra eto an-toerana sy any ivelany mifototra amin'ny tombontsoa iombonana.
Ny tena fotoana PCR fototra famolavolana fitsipika

Primer mandroso sy miverina

Ho an'ny PCR Real Time, ny famolavolana primer dia tena zava-dehibe.Ny Primers dia mifandray amin'ny maha-tokana sy ny fahombiazan'ny PCR amplification, ary azo namboarina miaraka amin'ireto fitsipika manaraka ireto:

• Halavany voalohany: 18-30bp.
• GC afa-po: 40-60%.
• Sanda Tm: Ny lozisialy fandrafetana voalohany, toy ny Primer 5, dia afaka manome ny sanda Tm an'ny primer.Tokony ho akaiky araka izay azo atao ny sandan'ny Tm an'ny primer ambony sy ambany.Azo ampiasaina koa ny raikipohy kajy Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Rehefa manao PCR, ny mari-pana eo ambanin'ny sandan'ny Tm voalohany amin'ny 5 °C dia voafantina amin'ny ankapobeny ho mari-pana fanalefahana (ny fitomboana mifanaraka amin'ny mari-pana fanalefahana dia mety hampitombo ny fahasamihafan'ny fihetsiky ny PCR).
• Primers sy PCR vokatra:

1. Ny halavan'ny vokatra fanamafisam-peo PCR voalohany indrindra dia 100-150bp.
2. Ny famolavolana primers ao amin'ny faritra ara-drafitra faharoa amin'ny môdely dia tokony hohalavirina araka izay azo atao.
3. Halaviro ny fiforonan'ny fototra mifameno 2 na mihoatra eo anelanelan'ny tendrony 3′ amin'ireo primera ambony sy ambany.
4. Primer 3′ terminal base dia tsy afaka manatrika miaraka amin'ny 3 fanampiny G na C misesy.
5. Ny primer dia tsy afaka manana rafitra mifameno, raha tsy izany dia hiforona ny firafitry ny volo, izay misy fiantraikany amin'ny fanamafisana ny PCR.
6. Ny ATCG dia tokony hozaraina araka izay azo atao amin'ny filaharana voalohany, ary ny tobin'ny terminal 3' dia tokony hohalavirina toy ny T.

Fanazavana fanampiny1:Cell DirectRT-qPCR Kit component fonosana fanampiny

1. Vahaolana Lysis Cell

 Ny fikambanana dia mitazona ny foto-kevitra momba ny fomba "fitantanana ara-tsiansa, kalitao avo lenta ary laharam-pahamehana, mpividy ambony indrindra ho an'ny China Manufacturer for 2 × Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U.
China Manufacturer forChina Taq DNA Polymerase sy Qpcr, Ny orinasanay dia manana tanjaka be dia be ary manana rafitra tambajotra varotra tsy tapaka sy tonga lafatra.Maniry izahay fa afaka mametraka fifandraisana ara-barotra tsara amin'ny mpanjifa rehetra eto an-toerana sy any ivelany mifototra amin'ny tombontsoa iombonana.

Ny tena fotoana PCR fototra famolavolana fitsipika

Primer mandroso sy miverina

Ho an'ny PCR Real Time, ny famolavolana primer dia tena zava-dehibe.Ny Primers dia mifandray amin'ny maha-tokana sy ny fahombiazan'ny PCR amplification, ary azo namboarina miaraka amin'ireto fitsipika manaraka ireto:

• Halavany voalohany: 18-30bp.
• GC afa-po: 40-60%.
• Sanda Tm: Ny lozisialy fandrafetana voalohany, toy ny Primer 5, dia afaka manome ny sanda Tm an'ny primer.Tokony ho akaiky araka izay azo atao ny sandan'ny Tm an'ny primer ambony sy ambany.Azo ampiasaina koa ny raikipohy kajy Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Rehefa manao PCR, ny mari-pana eo ambanin'ny sandan'ny Tm voalohany amin'ny 5 °C dia voafantina amin'ny ankapobeny ho mari-pana fanalefahana (ny fitomboana mifanaraka amin'ny mari-pana fanalefahana dia mety hampitombo ny fahasamihafan'ny fihetsiky ny PCR).
• Primers sy PCR vokatra:

1. Ny halavan'ny vokatra fanamafisam-peo PCR voalohany indrindra dia 100-150bp.
2. Ny famolavolana primers ao amin'ny faritra ara-drafitra faharoa amin'ny môdely dia tokony hohalavirina araka izay azo atao.
3. Halaviro ny fiforonan'ny fototra mifameno 2 na mihoatra eo anelanelan'ny tendrony 3′ amin'ireo primera ambony sy ambany.
4. Primer 3′ terminal base dia tsy afaka manatrika miaraka amin'ny 3 fanampiny G na C misesy.
5. Ny primer dia tsy afaka manana rafitra mifameno, raha tsy izany dia hiforona ny firafitry ny volo, izay misy fiantraikany amin'ny fanamafisana ny PCR.
6. Ny ATCG dia tokony hozaraina araka izay azo atao amin'ny filaharana voalohany, ary ny tobin'ny terminal 3' dia tokony hohalavirina toy ny T.

Fanazavana fanampiny1:Cell DirectRT-qPCR Kit component fonosana fanampiny

1. Vahaolana Lysis Cell

Boky torolalana:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman