Manaraka ny fifanarahana", mifanaraka amin'ny takian'ny tsena, miditra amin'ny fifaninanana tsena amin'ny kalitao tsara ary manome fanohanana feno kokoa sy tsara ho an'ny mpanjifa mba hamela azy ireo ho mpandresy lehibe.Ny fanenjehana ny orinasa, dia azo antoka fa ny mpanjifa 'fafinaretan'ny Shina New Product Best Selling Viral ADN&Rna Extraction Kit, Nanitatra ny raharaham-barotra ho any Alemaina, Torkia, Kanada, Etazonia, Indonezia, India, Nizeria, Brezila sy ny faritra hafa eto amin'izao tontolo izao.Miasa mafy izahay mba ho iray amin'ireo mpamatsy eran-tany tsara indrindra.
Manaraka ny fifanarahana", mifanaraka amin'ny takian'ny tsena, miditra amin'ny fifaninanana tsena amin'ny kalitao tsara ary manome fanohanana feno kokoa sy tsara ho an'ny mpanjifa mba hamela azy ireo ho mpandresy lehibe.Ny fikatsahana ny orinasa, dia azo antoka fa ny mpanjifa 'fifaliana ho an'nyChina Rna&DNA Extraction Kit sy Nucleic Acid Extraction, Miandrandra ny fametrahana fifandraisana mahasoa aminao izahay mifototra amin'ny vokatra sy vahaolana avo lenta, ny vidiny mirary ary ny serivisy tsara indrindra.Manantena izahay fa ny vokatray dia hitondra traikefa mahafinaritra ho anao ary hitondra fahatsapana hatsarana.
Boky torolalana:Fitaovana fanokanana RNA Total RNA Plus Torolàlana fampianarana

Manaraka ny fifanarahana", mifanaraka amin'ny takian'ny tsena, miditra amin'ny fifaninanana tsena amin'ny kalitao tsara ary manome fanohanana feno kokoa sy tsara ho an'ny mpanjifa mba hamela azy ireo ho mpandresy lehibe.Ny fanenjehana ny orinasa, dia azo antoka fa ny mpanjifa 'fafinaretan'ny Shina New Product Best Selling Viral ADN&Rna Extraction Kit, Nanitatra ny raharaham-barotra ho any Alemaina, Torkia, Kanada, Etazonia, Indonezia, India, Nizeria, Brezila sy ny faritra hafa eto amin'izao tontolo izao.Miasa mafy izahay mba ho iray amin'ireo mpamatsy eran-tany tsara indrindra.
China New Product China Rna&DNA Extraction Kit sy Nucleic Acid Extraction, Miandrandra ny fametrahana fifandraisana mahasoa aminao izahay mifototra amin'ny vokatra sy vahaolana avo lenta, vidiny mirary ary serivisy tsara indrindra.Manantena izahay fa ny vokatray dia hitondra traikefa mahafinaritra ho anao ary hitondra fahatsapana hatsarana.

Nopetahana ny tsanganana

Aorian'ny fametahana ny tsanganana, dia mihena ny vokatra RNA na tsy azo atao mihitsy aza ny manadio ny RNA, ary ambany ny mass RNA azo.

Famakafakana antony mahazatra:

1. Tsy feno ny fiatoana santionany.

Ny fahatapahan'ny santionany dia tsy mahasakana tanteraka ny ADN-CLEANING COLUMN, ary misy fiantraikany amin'ny vokatra sy ny kalitaon'ny ARN.Manoro hevitra ny fikosoham-bary haingana amin'ny azota azota ampy ianao rehefa tapaka ny santionany, Andramo ny hanorotoro ny rindrin'ny sela santionany, ny fonon'ny sela ary ny tavy hafa.Ho an'ny santionan'ny zavamaniry misy polysaccharides polyol, dia manoro hevitra anao izahay hampiasa Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

2. Rehefa mitsoka ny supernatant santionany misaraka miaraka amin'ny ADN-Cleaning Column, dia azo tsofina ny mety ho entona miparitaka amin'ny sela.

Ny antsanga voazarazara ho an'ny sela nalaina dia hahatonga ny Tsanganana RNA-ONLY izay ho voasakana rehefa atao ny hetsika adsorption RNA (jereo ny dingana 6).Manoro hevitra anao amim-pitandremana izahay rehefa mitsentsitra ity supernatant ity mba hisorohana ny fako selan'ny setroka.

3. Be loatra ny santionany voalohany.

Ny fampiasana santionany be loatra dia miteraka fizarazarana santionany tsy feno na lysis sela tsy feno ataon'ny Buffer PSL1, ka miteraka fanakanana ny tsanganana fanadiovana mandritra ny fanadiovana.Kit Isolation RNA Total Plant Ny santionany miasa voadio tsirairay dia 50 mg.Ho an'ny santionan'ny zavamaniry misy polysaccharides polyol, dia manoro hevitra anao izahay hanandrana Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

4. Ny hafanan'ny centrifuge dia ambany loatra.

Ny fitokana-monina sy ny fanadiovana ny RNA manontolo dia atao amin'ny mari-pana amin'ny efitrano (20-25°C), afa-tsy fa ny sela santionany dia tapaka amin'ny ranon-javatra azota. Ny hafanan'ny sasany cryogenic centrifuges dia ambany noho ny 20℃, izay mety hiteraka fanakanana ny Tsanganana Fanadiovana ADN sy/na Tsanganana RNA Ihany.Raha mitranga izany, apetraho amin'ny 20-25 ny mari-pana centrifuge℃, aryAtaovy azo antoka fa ny fangaro lysis sy/na ny supernatant nampiana ethanol dia nafanaina hatramin'ny 37°C.

Tsy misy RNA nalaina na ambany ny vokatra ARN

Matetika misy lafin-javatra maro izay misy fiantraikany amin'ny fahombiazan'ny fanarenana, toy ny: ny votoatin'ny RNA santionany, ny fomba fiasa, ny habetsaky ny elution, sns.

Famakafakana ny antony mahazatra toy izao manaraka izao:

1. Nisy fandroana gilasy na centrifugation ambany hafanana (4°C) nandritra ny fandidiana.

Soso-kevitra: miasa amin'ny mari-pana (15-25°C) amin'ny dingana rehetra, aza manao ranomandry fandroana sy ny hafanana ambany centrifugation.

2. Ny ARN dia simba noho ny fitehirizana tsy mety ny santionany na ny fitehirizana maharitra ny santionany.

Soso-kevitra: Ny santionany vao voangona dia tokony havaingana haingana amin'ny azota ranon-javatra, ary avy eo tehirizina amin'ny -80 ° C mandritra ny fotoana maharitra, fadio ny miverimberina miverimberina sy ny fandoroana santionany;na manondraka avy hatrany ny santionany amin'ny RNA stabilizer RNAlater solution (santionan'ny biby).

3. Ny tsy fahampian'ny santionan'ny fragmentation sy ny lysis dia mitarika amin'ny fanakanana ny tsanganana fanadiovana.

Soso-kevitra: Rehefa mitoto ny tavy, azafady mba ho azo antoka fa voatoto tsara ny tavy, ary afindrao haingana any amin'ny Buffer PSL1 efa voaomana mialoha (hamarino fa nampiana ny ampahany marina amin'ny β-ME, jereo ny dingana 1 amin'ny fomba fiasa).

4. Diso nampidirina ilay eluent.

Soso-kevitra: Ataovy azo antoka fa mitete eo afovoan'ny fonon'ny tsanganana fanadiovana ny RNase-Free ddH2O.

5. Tsy nampidirina tao amin'ny Buffer PSL2 na Buffer PRW2 ny habetsaky ny ethanol tanteraka.

Soso-kevitra: Araho azafady ny toromarika, ampio ny habetsahan'ny ethanol tanteraka marina amin'ny Buffer PSL2 sy Buffer PRW2 ary afangaro tsara alohan'ny hampiasana ny kitapo.

6. Tsy mety ny habetsahan'ny santionany.

Soso-kevitra: Mampiasà tavy 50 mg isaky ny 500 μl buffer PSL1.Ny fampiasana tavy be loatra dia hampihena ny habetsahan'ny ARN azo alaina ary hihena koa ny fahadiovan'ny ARN aterany.Manoro hevitra mafy izahay fa ny fatran'ny santionany voalohany dia tsy tokony hihoatra ny 50 mg isaky ny asa fitrandrahana RNA.

7. Volon'ny elution tsy mety na elution tsy feno.

Soso-kevitra: Ny habetsahan'ny eluent amin'ny tsanganana fanadiovana dia 50-200 μl;raha tsy mahafa-po ny vokatry ny elution, dia soso-kevitra ny hanitarana ny fotoana amin'ny mari-pana amin'ny efitrano aorian'ny fampidirana RNase-Free ddH2O, toy ny 5-10min.

8. Ny tsanganana fanadiovana dia manana ethanol sisa tavela aorian'ny fanasana amin'ny BufferPRW2.

Soso-kevitra: Raha ny fantsona tsy misy na inona na inona no centrifuged 1 min ary mbola misy ethanol tavela aorian'ny fanasana ao amin'ny Buffer PRW2, dia azonao atao ny mampitombo ny fotoana ny fantsona tsy misy na inona na inona centrifugation ho 2 min, na mametraka ny fanadiovana tsanganana amin'ny efitra mari-pana mandritra ny 5 minitra mba hanesorana tanteraka ny sisa tavela ethanol.

9. Ny kitapo dia nampiasaina tamin'ny fomba diso.

Soso-kevitra: Ho an'ny santionan'ny zavamaniry misy polysaccharides polyphenolic, ny fampiasana kitapo mahazatra toy ny Plant Total RNA Isolation Kit dia mety tsy hahazo santionany RNA mety indrindra.Manoro hevitra anao izahay hampiasa Plant Total RNA IsolationKit Plus, izay natao manokana ho an'ny santionan'ny zavamaniry polyphenolic polysaccharide.Kit novolavolaina manokana hanesorana ny ARN avy amin'ny santionan'ny zavamaniry polyphenol sy polysaccharide.

Ny sanda OD260/OD280 dia ambany

Ny elution RNA miaraka amin'ny ddH2O ary ampiasaina amin'ny famakiana spectrophotometer dia miteraka sanda ambany OD260/OD280.Manoro hevitra izahay ny hampiasa 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (fa tsy RNase-Free ddH2O hanesorana ny RNA) mba hahazoana ny sanda OD260/OD280 marina, jereo ny “Fanadihadiana momba ny fifantohana sy ny fanadiovana RNA” ao amin'ny pejy 19.

Ny ARN voadio dia simba

Ny kalitaon'ny RNA voadio dia mifandraika amin'ny anton-javatra toy ny fitehirizana santionany, ny fandotoana ny RNase ary ny fanodikodinana.

Famakafakana ny antony mahazatra:

1. Tsy voatahiry ara-potoana taorian'ny fanangonana ny santionany.

Soso-kevitra: Raha toa ka tsy ampiasaina amin'ny fotoana aorian'ny fanangonana ny santionan'ny tavy, azafady tehirizo ao anaty ranon-javatra azota amin'ny hafanana ambany avy hatrany izy ireo na afindra amin'ny -80 ° C ho an'ny fitehirizana maharitra aorian'ny hatsiaka haingana amin'ny azota azota, na atsoboka avy hatrany ny santionany ao amin'ny RNA stabilizer RNAlater solution (anisan'ny biby).Ho an'ny fitrandrahana RNA, andramo ny mampiasa santionany vao voaangona.

2. Miverimberina mamirifiry sy mandevona santionany tavy.

Soso-kevitra: Rehefa mitahiry santionany amin'ny tavy, dia tsara kokoa ny manapaka azy ireo ho tapatapaka kely mba hotehirizina, ary alao ny ampahany amin'izy ireo rehefa ampiasaina mba hisorohana ny fahasimban'ny ARN vokatry ny fanamainana miverimberina sy ny fanalefahana ireo santionany.

3. Ny RNase dia ampidirina ao amin'ny efitrano fandidiana na tsy manao fonon-tanana, saron-tava, sns.

Soso-kevitra: Ny fanandramana fitrandrahana RNA dia tsara indrindra atao amin'ny asa RNA misaraka, ary ny latabatra laboratoara dia tokony hodiovina alohan'ny andrana, ary tokony hanaovana fonon-tanana sy saron-tava fanariana mandritra ny andrana mba hisorohana ny fahasimban'ny RNA vokatry ny fampidirana ny RNase amin'ny ankapobeny.

4. Ny reagent dia voaloton'ny RNase mandritra ny fampiasana.

Soso-kevitra: Soloy andiany vaovao amin'ny fitaovana fitrandrahana RNA totalin'ny zavamaniry ho an'ny fanandramana mifandraika amin'izany.

5. Ny fantsona centrifuge sy ny toro-hevitra pipette ampiasaina amin'ny fanodikodinana RNA dia voaloto amin'ny RNase.

Soso-kevitra: Ataovy azo antoka fa ny fantsona centrifuge, toro-hevitra pipette, pipettes, sns ampiasaina amin'ny fitrandrahana RNA dia tsy misy RNase.

Boky torolalana:

Fitaovana fanokanana RNA Total RNA Plus Torolàlana fampianarana