Ny traikefan'ny fitantanana tetikasa tena be dia be ary modely iray amin'ny mpamatsy iray manokana dia mahatonga ny maha-zava-dehibe ny fifandraisana amin'ny fikambanana sy ny fahatakaranay mora ny zavatra antenainao momba ny orinasa vita amin'ny fivarotana mafana any Shina.QpcrKit V2, Nikaroka mialoha ny fananganana rohy tsara sy manampy amin'ny mpamatsy rehetra eto an-tany izahay.Faly miarahaba anao izahay mba hifandray aminay mba hanombohan'ny fifanakalozan-kevitra momba ny fomba ahafahanay manatanteraka izany.
Ny traikefan'ny fitantanan-draharaha be dia be ary ny modely mpamatsy iray manokana dia mahatonga ny maha-zava-dehibe ny fifandraisana amin'ny fikambanana sy ny fahatakaranay mora ny zavatra andrasanao.China Taq DNA Polymerase, Qpcr, Izy ireo dia modely matanjaka ary mampiroborobo amin'ny fomba mahomby manerana izao tontolo izao.Tsy manjavona na oviana na oviana ireo fiasa lehibe ao anatin'ny fotoana fohy, tsy maintsy mifanaraka amin'ny filanao ny kalitao tsara.Tarihin'ny fitsipiky ny fahamalinana, ny fahaiza-manao, ny sendikà ary ny fanavaozana.ny orinasa.manao ezaka tsara hanitarana ny varotra iraisam-pirenena, hampiakatra ny fikambanany.rofit ary hampiakatra ny haavony fanondranana.Matoky izahay fa hanana fanantenana mamirapiratra ary hozaraina eran'izao tontolo izao amin'ny taona ho avy.

fepetra arahana

50 × 20μl rxns, 200 × 20μl rxns, 1000 × 20μl rxns, 2000 × 20μl rxns

Ny 2X Real PCR EasyTM Mix-Taqman nomen'ny kitapo Real Time PCR EasyTM-Taqman dia rafitra premix vaovao izay mampiasa probe fluorescent manokana ho an'ny fanehoan-kevitra fanamafisam-peo PCR Real Time, izay afaka manatsara ny fahasamihafan'ny vokatra sy ny fihetseham-po.ROX dia omena ho loko fanaraha-maso anatiny.

2X Real PCR EasyTM Mix-Taqman dia misy ny Taq DNA Polymerase tsy manam-paharoa an'i Foregene.Raha oharina amin'ny anzima Taq mahazatra, dia manana tombony amin'ny fahombiazan'ny fanamafisam-peo avo lenta, ny fahaiza-manao fanamafisana manokana matanjaka ary ny tahan'ny tsy fitoviana ambany.Afaka mampihena ny fanamafisam-peo tsy voafaritra ary manatsara ny fahamarinan'ny PCR.

Kit singa

Toetra & tombony

■ Tsotra—2X PCR Mix mba hampihenana ny fahadisoana andrana sy ny fotoana fiasana

■ Ny buffer voafaritra tsara sy ny enzyme Taq manomboka mafana dia afaka manakana ny fanamafisana tsy voafaritra sy ny fananganana dimer primer

■ Saro-pady avo—afaka mamantatra ireo dika mitovy amin'ny môdely

■ Fahaiza-manao tsara—mifanaraka amin'ny ankamaroan'ny zavamaneno PCR amin'ny fotoana tena izy

Fampiharana kit

qPCR fanadihadiana

Fizotran'asa

SARY

Fitehirizana sy ny fiainana talantalana

Ity kitapo ity dia tokony hotehirizina lavitry ny hazavana ary tokony hotehirizina amin'ny -20 ℃.Raha ampiasaina matetika, dia azo tehirizina amin'ny 4 ℃ ihany koa mandritra ny fotoana fohy (10 andro). Ny traikefan'ny fitantanana tetikasa tena be dia be ary modely iray amin'ny mpamatsy iray manokana dia mahatonga ny maha-zava-dehibe ny fifandraisana amin'ny fikambanana sy ny fahatakaranay mora ny zavatra andrasanao amin'ny orinasa vita amin'ny fivarotana mafana any Shina.QpcrKit V2, Nikaroka mialoha ny fananganana rohy tsara sy manampy amin'ny mpamatsy rehetra eto an-tany izahay.Faly miarahaba anao izahay mba hifandray aminay mba hanombohan'ny fifanakalozan-kevitra momba ny fomba ahafahanay manatanteraka izany.
Orinasa natao mafana-varotraChina Taq DNA Polymerase, Qpcr, Izy ireo dia modely matanjaka sy mampiroborobo amin'ny fomba mahomby manerana izao tontolo izao.Tsy manjavona na oviana na oviana ireo fiasa lehibe ao anatin'ny fotoana fohy, tsy maintsy mifanaraka amin'ny filanao ny kalitao tsara.Tarihin'ny fitsipiky ny fahamalinana, ny fahaiza-manao, ny sendikà ary ny fanavaozana.ny orinasa.manao ezaka tsara hanitarana ny varotra iraisam-pirenena, hampiakatra ny fikambanany.rofit ary hampiakatra ny haavony fanondranana.Matoky izahay fa hanana fanantenana mamirapiratra ary hozaraina eran'izao tontolo izao amin'ny taona ho avy.

Tsy misy famantarana amplification

1. Ny Taq DNA Polymerase ao amin'ny kitapo dia very ny asany noho ny fitehirizana tsy mety na ny fahataperan'ny kitapo.
Soso-kevitra: Hamafiso ny fepetra fitahirizana ny kitapo;ampio indray ny isan'ny Taq DNA Polymerase amin'ny rafitra PCR na mividy Kit PCR Real Time vaovao ho an'ny fanandramana mifandraika amin'izany.

2. Betsaka ny inhibitors ny Taq DNA Polymerase ao amin'ny maodely ADN.
Soso-kevitra: Avereno diovina ny môdely na ahena ny habetsaky ny môdely ampiasaina.

3. Tsy mety ny fifantohana Mg2+.
Soso-kevitra: Ny fifantohan'ny Mg2+ an'ny 2× Real PCR Mix omenay dia 3.5mM.Na izany aza, ho an'ny voalohany sy ny lasitra manokana, mety ho ambony kokoa ny fifantohana Mg2+.Noho izany dia azonao atao ny manampy mivantana ny MgCl2 mba hanatsarana ny fifantohana Mg2+.Amporisihina ny hampitombo ny Mg2+ 0.5mM isaky ny fanatsarana.

4. Ny fepetra fanamafisam-peo PCR dia tsy mety, ary ny filaharana na ny fifantohana dia tsy mety.
Soso-kevitra: hamafiso ny fahamarinan'ny filaharan'ny primer ary tsy simba ny primer;raha tsy tsara ny mari-pamantarana fanamafisam-peo, andramo ny fampidinana ny mari-pana fanalana ary amboary araka ny tokony ho izy ny fifantohana voalohany.

5. Ny habetsahan'ny môdely dia kely loatra na be loatra.
Soso-kevitra: Manaova dilution gradient linearization môdely, ary safidio ny fifantohan'ny môdely misy fiantraikany PCR tsara indrindra ho an'ny fanandramana PCR Real Time.

Ny NTC dia manana sanda fluorescence avo loatra

1.Reagent loto nateraky ny fandidiana.
Soso-kevitra: Soloy reagents vaovao ho an'ny andrana PCR Real Time.

2. Nitranga ny fandotoana nandritra ny fanomanana ny rafitra fanehoan-kevitra PCR.
Soso-kevitra: Manaova fepetra fiarovana ilaina mandritra ny fandidiana, toy ny: manao fonon-tanana vita amin'ny latex, mampiasa ny tendron'ny pipette misy sivana, sns.

3. Ny primers dia simba, ary ny fahapotehan'ny primers dia hiteraka tsy voafaritra amplification.
Soso-kevitra: Ampiasao ny electrophoresis SDS-PAGE hamantarana raha simba ny primers, ary manolo azy ireo amin'ny primer vaovao ho an'ny fanandramana PCR Real Time.

Dimer primer na fanamafisam-peo tsy voafaritra

1. Tsy mety ny fifantohana Mg2+.
Soso-kevitra: Ny fifantohana Mg2+ amin'ny 2 × Real PCR EasyTM Mix izay omenay dia 3.5 mM.Na izany aza, ho an'ny voalohany sy ny lasitra manokana, mety ho ambony kokoa ny fifantohana Mg2+.Noho izany dia azonao atao ny manampy mivantana ny MgCl2 mba hanatsarana ny fifantohana Mg2+.Amporisihina ny hampitombo ny Mg2+ 0.5mM isaky ny fanatsarana.

2.Iva loatra ny mari-pana fanalana ny PCR.
Soso-kevitra: Ampitomboy amin'ny 1 ℃ na 2 ℃ ny mari-pana amin'ny PCR.

3. Ny vokatra PCR dia lava loatra.
Soso-kevitra: Tokony ho eo anelanelan'ny 100-150bp ny halavan'ny vokatra PCR Real Time, tsy mihoatra ny 500bp.

4. Ny primer dia simba, ary ny fahasimban'ny primers dia hitarika amin'ny fisehoan'ny fanamafisana manokana.
Soso-kevitra: Ampiasao ny electrophoresis SDS-PAGE hamantarana raha simba ny primers, ary manolo azy ireo amin'ny primer vaovao ho an'ny fanandramana PCR Real Time.

5. Ny rafitra PCR dia tsy mety, na ny rafitra dia kely loatra.
Soso-kevitra: Ny rafitra fanehoan-kevitry ny PCR dia kely loatra ka hampihena ny fahamarinan'ny fitiliana.Ny tsara indrindra dia ny mampiasa ny rafitra fanehoan-kevitra natolotry ny fitaovana PCR quantitative mba hamerenana ny andrana PCR Real Time.

Faharatsian'ny fiverimberenan'ny soatoavina quantitative

1. Ny fitaovana dia tsy miasa.
Soso-kevitra: Mety misy lesoka eo amin'ny lavaka PCR tsirairay amin'ny fitaovana, ka miteraka tsy fahampian'ny famokarana mandritra ny fitantanana ny mari-pana na ny fitiliana.Azafady, jereo araka ny torolalan'ny fitaovana mifanaraka amin'izany.

2. Ny fahadiovana santionany dia tsy tsara.
Soso-kevitra: Ny santionany maloto dia hitarika ho amin'ny tsy fahampian'ny famerenana ny fanandramana, izay ahitana ny fahadiovan'ny môdely sy ny primers.Ny tsara indrindra dia ny manadio ny môdely, ary ny primer dia voadio tsara indrindra amin'ny SDS-PAGE.

3. Ny fanomanana sy ny fitehirizana ny rafitra PCR dia lava loatra.
Soso-kevitra: Ampiasao ny rafitra PCR Real Time ho an'ny fanandramana PCR avy hatrany aorian'ny fanomanana, ary aza avela ela loatra.

4. Ny fepetra fanamafisam-peo PCR dia tsy mety, ary ny filaharana na ny fifantohana dia tsy mety.
Soso-kevitra: hamafiso ny fahamarinan'ny filaharan'ny primer ary tsy simba ny primer;raha tsy tsara ny mari-pamantarana fanamafisam-peo, andramo ny fampidinana ny mari-pana fanalana ary amboary araka ny tokony ho izy ny fifantohana voalohany.

5. Ny rafitra PCR dia tsy mety, na ny rafitra dia kely loatra.
Soso-kevitra: Ny rafitra fanehoan-kevitry ny PCR dia kely loatra ka hampihena ny fahamarinan'ny fitiliana.Ny tsara indrindra dia ny mampiasa ny rafitra fanehoan-kevitra natolotry ny fitaovana PCR quantitative mba hamerenana ny andrana PCR Real Time.