Torolàlana ho an'ny famakafakana olana

The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。

Tsy misy ARN azo alaina na ambany ny vokatra azo avy amin'ny asidra nokleika

Matetika misy lafin-javatra maro izay misy fiantraikany amin'ny fahombiazan'ny fanarenana, toy ny: ny votoatin'ny RNA santionany, ny fomba fiasa, ny habetsaky ny elution, sns.

Famakafakana ny antony mahazatra:

1. Ice fandroana na ny hafanana ambany (4 ° C) centrifugation mandritra ny fandidiana.

Soso-kevitra: Fampandehanana ny mari-pana ao amin'ny efitrano (15-25 ° C), tsy misy ranomandry sy centrifuge ambany hafanana.

2. Fitehirizana santionany tsy mety na fitahirizana santionany ela loatra.

Soso-kevitra: Tehirizo ny santionany amin'ny -80 ° C na atsofohy amin'ny azota ranon-javatra, ary ialao ny fampiasana fanamafisam-peo miverimberina;Miezaha mampiasa santionany vao voaangona ho an'ny fitrandrahana RNA.

3. Tsy ampy santionany lysis

Soso-kevitra: Azafady mba ho azo antoka fa ny santionany sy ny vahaolana miasa (Linear Acrylamide) dia nifangaro tsara ary natsipy nandritra ny 10 minitra tamin'ny mari-pana (15-25 ° C)

4. Diso nampidirina ilay eluent

Soso-kevitra: Ataovy azo antoka fa ampiana RNase-Free ddH2O eo afovoan'ny fonon'ny tsanganana fanadiovana.

5. Ny habetsahan'ny ethanol anhydrous amin'ny Buffer viRW2

Soso-kevitra: Araho azafady ny torolàlana, ampio ny habetsahan'ny ethanol anhydrous marina ao amin'ny Buffer viRW2 ary afangaro tsara alohan'ny hampiasana ilay kitapo.

6. Fampiasana santionany tsy mety.

Soso-kevitra: 200µl ny santionany isaky ny 500μl ny buffer viRL.Ny habetsahan'ny santionany be loatra dia miteraka fihenan'ny tahan'ny fitrandrahana RNA.

7. Ny habetsahan'ny elution tsy mety na ny elution tsy feno.

Soso-kevitra: Ny boky eluent ny tsanganana fanadiovana dia 30-50μl;raha tsy mahafa-po ny effet elution dia asaina ampiana RNase-Free ddH efa nafanaina mialoha.₂O ary hanitatra ny fotoana fametrahana amin'ny mari-pana, toy ny 5-10min

8. Ny tsanganana fanadiovana dia manana tavela ethanol aorian'ny fanasana amin'ny Buffer viRW2.

Soso-kevitra: Raha mbola mijanona ny ethanol aorian'ny fanasana ao amin'ny Buffer viRW2 sy ny centrifugation amin'ny tavoahangy tsy misy na inona na inona mandritra ny 2min, ny tsanganana fanadiovana dia azo avela amin'ny mari-pana ao amin'ny efitrano mandritra ny 5min aorian'ny centrifugation tsy misy fantsona mba hanesorana tanteraka ny ethanol sisa.

Ny fanimbana ny molekiola RNA voadio

Ny kalitaon'ny RNA voadio dia mifandraika amin'ny anton-javatra toy ny fitahirizana santionany, ny fandotoana ny RNase ary ny fiasana.

Famakafakana ny antony mahazatra:

1. Tsy voavonjy ara-potoana ireo santionany voaangona.

Soso-kevitra: Raha tsy ampiasaina amin'ny fotoana aorian'ny fanangonana ny santionany, azafady tehirizo amin'ny -80 ℃ na azota azota avy hatrany.Ho an'ny fitrandrahana molekiola RNA, andramo mampiasa santionany vao voaangona isaky ny azo atao.

2. Nangatsiaka sy natsofoka imbetsaka ny santionany voaangona.

Soso-kevitra: Fadio ny fanala miverimberina sy ny fanalefahana (tsy mihoatra ny indray mandeha) mandritra ny fanangonana sy fitehirizana santionany, raha tsy izany dia hihena ny vokatra azo avy amin'ny asidra nokleika.

3. Ny RNase dia nampidirina tao amin'ny efitrano fandidiana na tsy nisy fonon-tanana fanariana, saron-tava, sns.

Soso-kevitra: Ny fitrandrahana ny molekiola RNA dia tsara indrindra atao ao amin'ny efitrano fandidiana RNA mitokana, ary ny latabatra andrana dia diovina alohan'ny andrana.Manaova fonon-tanana sy saron-tava fanariana mandritra ny andrana mba hisorohana ny fahasimban'ny RNA vokatry ny fampidirana RNase.

4. Ny reagent dia voaloton'ny RNase mandritra ny fampiasana.

Soso-kevitra: Soloy ny Viral RNA Isolation Kit ho an'ny fanandramana mifandraika amin'izany.

5.Ny fandotoana RNase amin'ny fantsona centrifuge, toro-hevitra amin'ny pipette, sns. Soso-kevitra: Ataovy azo antoka fa tsy misy RNase ny fantsona centrifuge, toro-hevitra ary pipette.

Ny molekiola RNA voadio dia nisy fiantraikany tamin'ny fanandramana midina

Ny molekiola RNA nodiovin'ny tsanganana fanadiovana dia hisy fiantraikany amin'ny fanandramana any ambany raha be loatra ny sira na proteinina, toy ny: transcription mivadika, Northern Blot, sns.

1. Misy sira sisa tavela ao amin'ny molekiolan'ny ARN navoaka.

Soso-kevitra: Ataovy azo antoka fa nampidirina ao amin'ny Buffer viRW2 ny habetsahan'ny ethanol anhydrous marina, ary sasao indroa ny tsanganana fanadiovana araka ny hafainganam-pandehan'ny centrifugation marina amin'ny torolàlana miasa; Raha mbola misy sira sisa tavela dia azonao atao ny manampy Buffer viRW2 amin'ny tsanganana fanadiovana, ary avelao amin'ny mari-pana mandritra ny 5min.Avy eo dia manaova centrifugation mba hanesorana ny fandotoana ion-tsira hatramin'ny farany

2. Misy ethanol sisa tavela ao amin'ny molekiola RNA voaroaka

Soso-kevitra: rehefa nanamarina fa ny tsanganana fanadiovana dia nosasana tamin'ny Buffer viRW2, dia manaova centrifugation foana-tube araka ny hafainganam-pandehan'ny centrifugal amin'ny toromarika miasa.Raha mbola misy ethanol tavela, dia azo avela mandritra ny 5 minitra amin'ny mari-pana amin'ny efitrano aorian'ny fanindronana fantsona tsy misy na inona na inona mba hanesorana ny ethanol tavela amin'ny habeny lehibe indrindra.

Boky torolalana:

Viral RNA Isolation Kit Torolàlana fampianarana