Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Reagent(zebrafish)
Famaritana
Ity kitapo ity dia mampiasa rafitra lysis buffer tsy manam-paharoa mba hamoahana haingana ny ADN génomika avy amin'ny trondro zebra sy ny tavy trondro an-dranomamy hafa, ny vombony na ny atody trondro ho an'ny fihetsiky ny PCR, noho izany dia mety indrindra amin'ny fitsapana fototarazo midadasika.Ny dingan'ny famoahana ADN génomika avy amin'ny buffer lysis dia vita ao anatin'ny 10-30 minitra amin'ny 65 ° C.Tsy ilaina ny dingana hafa toy ny fanesorana proteinina sy RNA, ary ny ADN trace navoaka dia azo ampiasaina ho modely amin'ny fihetsiky ny PCR.
2× PCR EasyTM Mix (UNG) dia mampiasa dUTP fa tsy dTTP miorina amin’ny 2× PCR EasyTM Mix, ary manampy anzima UNG (Uracil-N-glycosylase) izay afaka manimba ny môdely misy dUTP amin’ny fotoana iray ihany.Alohan'ny fihetsiketsehan'ny PCR, ny enzyme UNG dia ampiasaina hanimba ny vokatra PCR misy uracil.Ny enzyme UNG dia tsy hisy fiantraikany amin'ny môdely tsy misy uracil, ka miantoka ny maha-tokana sy ny fahamarinan'ny amplification ary manakana ny mety hisian'ny fitsapana fototarazo midadasika.Nisy fandotoana ny vokatra PCR.
D-Taq DNA polymerase dia polymerase ADN novolavolain'i Foregene manokana ho an'ny fanehoan-kevitra PCR mivantana.D-Taq ADN polymerase dia manana fandeferana mafy amin'ny karazana PCR fanehoan-kevitra inhibitors, ary afaka amplify tsara ny soritry ny ADN amin'ny rafitra fanehoan-kevitra sarotra isan-karazany, ary ny hafainganam-pandeha amplification mety hahatratra 2Kb/min, izay mety indrindra ho an'ny Direct PCR fanehoan-kevitra.
fepetra arahana
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Kit singa
Fizarana I | Buffer FP |
Foregene Protease | |
6× ADN Loading Buffer | |
Fizarana II | 2×PCR moraTMMix(UNG) |
torolalana |
Toetra & tombony
■ Tsy ilaina ny fanadiovana ADN mandany fotoana sy lafo.
■ Kely ny fitakiana santionany, raha kely indrindra ny vombony trondro 1mg na atody trondro 10 azo andrana.
■ Tsy mila fitsaboana manokana toy ny fikosoham-bary sy fanosihosena, ary tsotra ny fandidiana.
■ Ny rafitra PCR manohitra ny fandotoana 2 × PCR EasyTM Mix (UNG), izay afaka manafoana tsara ny loto ateraky ny vokatra PCR ary miantoka ny maha-tokana sy ny fahamarinan'ny amplification.
■ Optimized PCR rafitra mahatonga ny PCR manana manokana manokana sy matanjaka kokoa ny fandeferana amin'ny PCR inhibitors fanehoan-kevitra.
Kit paramètre
Fampiharana: trondro zebra sy trondro an-dranomamy hafa.
ADN navoaka avy amin'ny santionany lysis: ampiasaina ho toy ny PCR môdely ihany.
Ny kitapo dia azo ampiasaina amin'ireto tanjona manaraka ireto: famantarana ny transgenose, genotyping biby, sns.
Workflow
Fitehirizana sy ny fiainana talantalana
Ny ampahany I amin'ity kitapo ity dia tokony hotehirizina amin'ny 2-8 ℃.
Ny reagent Buffer FP dia azo tehirizina mandritra ny 12 volana amin'ny toe-javatra maina;dia azo tehirizina ao amin'ny 2-8 ℃ ho lava fitehirizana.
v Reagent Foregene Protease dia manana raikipohy tokana.Mba hahazoana antoka ny asany sy ny fahamarinany, azafady tehirizo ao amin'ny 4 ℃ mandritra ny 12 volana.
vReagent 6×DNA Loading Buffer dia azo tehirizina amin'ny 4 ℃ na -20 ℃ mandritra ny fotoana maharitra.
Ny ampahany II amin'ity kitapo ity dia tokony hotehirizina amin'ny -20 ℃.
vReagent 2×PCR EasyTM Mix(UNG), raha ampiasaina matetika, dia azo tehirizina ao amin'ny 4 ℃ koa izy io ho fitahirizana fohy (ampiasaina ao anatin'ny 10 andro).