(96-tsara) Kit RT-qPCR QuickEasy Cell Direct - Taqman
Famaritana
ny(96-tsara) QuickEasyTM Kit RT-qPCR Cell Direct–TaqmanTENArafitra buffer lysis tokanato avoaka haingana ny RNAavy amin'ny sela kolontsainasantionany ho an'ny fanehoan-kevitra RT-qPCR, manafoana ny fotoana mandany fotoana sy miasaNy fizotran'ny fanadiovana RNA, ary 7 minitra monja vao mahazo ny môdely RNA ilaina.ny5× Direct RT MixSY2× Direct qPCR Mix-SYBRomena ao anaty boaty afaka haingana symahazo tsara ny tena-fotoana quantitativeVokatry ny PCR.
5 × Direct RT Mix sy 2 × Direct qPCR Mix-Taqman dia manana fandeferana mahery vaika, ary afaka mampiasa ny lysate ny santionany hotsapaina ho modely ho an'ny fandikana mivadika mahomby sy fanamafisana manokana.Ny reagent dia misy Foregene Reverse Transcriptase tokana manana fifandraisana ambony amin'ny RNA, ary koa ny Hot D-Taq DNA Polymerase, dNTPs, MgCl2 , fanehoan-kevitra buffer, PCR optimizer sy stabilizer, ary azo ampiasaina miaraka amin'ny lysis buffer mba hamantarana ny santionany haingana, mora sy araka ny marina, ary manana ny toetra ny saro-pady avo, mafy specificity sy ny fahamarinan-toerana tsara.
Ny kitapo dia mikendry ny micro-system lysis ny 96-tsara kolontsaina sela, ary manana fitoviana tsara sy tsy miovaova;Ny singa kit dia manome fanehoan-kevitra lysis 96, fanehoan-kevitra transcription 96 ary fanehoan-kevitra 96 × 2 qPCR, izay afaka mihaona amin'ny takelaka sela 96-tsara ho an'ny fampiasana indray mandeha, misoroka ny loto vokatry ny fanokafana miverimberina, ny hatsiaka ary ny fandotoana ny reagents ary ny fahasimban'ny fahombiazan'ny reagent.
Kit singa
| Kit composition ( 50 μL lysis system/20 μLRT rafitra fanehoan-kevitra / 20μL qPCR rafitra fanehoan-kevitra) | DRT-03021 | fanamarihana | |
| 96T | |||
| anjaraI | BufferCL | 5 mL | SELALysis |
| ForegeneProtease Plus II | 100 μL | ||
| BufferST | 500 μL | ||
| anjara II | ADNgaoma | 100 μL | |
| 5× Direct RT Mix | 400 μL | RT | |
| 2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 mL × 2 | qPCR | |
| 50 × ROX Reference Fandokoana | 400µL | ||
| RNase- maimaim-poanaddH2 O | 1,7 mL |
| |
| Misan-taona | 1 tapa | 1 fanompoana | |
*: Ny ADN Eraser lysis reagent dia tafiditra ao amin'ny Fizarana II amin'ny kitapo;Ny singa Cell Lysis, RT, ary qPCR dia azo vidiana misaraka.
Toetra & tombony
■Tsotra sy mahomby : miaraka amin'ny teknolojia Cell Direct RT, ny santionany RNA dia azo alaina ao anatin'ny 7 minitra fotsiny.
■ Kely ny fitakiana santionany, hatramin'ny sela 10 no azo andrana.
■ Fampidirana avo lenta: afaka mamantatra haingana ny RNA ao amin'ny sela kolontsaina ao amin'ny takelaka 384, 96, 24, 12, 6-lavadrano izy.
■ ADN Eraser dia afaka manala haingana ireo génome navoaka, mampihena be ny fiantraikan'ny voka-panadinana manaraka.
■ Optimized RT sy qPCR rafitra mahatonga ny roa-dingana RT-PCR transcription mivadika ho mahomby kokoa sy PCR manokana kokoa, ary mahatohitra kokoa RT-qPCR fanehoan-kevitra inhibitors.
Fampiharana kit
Fampiharana: cellule cultié.
- RNA navoakan'ny santionany lysis: azo ampiharina amin'ny maodely RT-qPCR an'ity kitapo ity ihany.
- Ny kitapo dia azo ampiasaina amin'ireto tanjona manaraka ireto: famakafakana fanehoana ny fototarazo, fanamarinana ny vokatry ny fampanginana ny fototarazo mpanelanelana siRNA, fitiliana zava-mahadomelina, sns.
Fitehirizana sy ny fiainana talantalana
Ny ampahany I amin'ity kitapo ity dia tokony hotehirizina amin'ny 4℃;Ny ampahany II dia tokony hotehirizina amin'ny -20 ℃.
Ny Foregene Protease Plus II dia tokony hotehirizina amin'ny 4℃, aza mangatsiaka amin'ny -20 ℃.
Reagent 2×Direct qPCR Mix-Taqman dia tokony hotehirizina amin'ny -20℃ao anaty haizina;raha ampiasaina matetika dia azo tehirizina amin'ny 4 ihany koa℃ ho fitahirizana fohy (ampiasaina ao anatin'ny 10 andro).
Ny tena fotoana PCR fototra famolavolana fitsipika
Primer mandroso sy miverina
Ho an'ny PCR Real Time, ny famolavolana primer dia tena zava-dehibe.Ny Primers dia mifandray amin'ny maha-tokana sy ny fahombiazan'ny PCR amplification, ary azo namboarina miaraka amin'ireto fitsipika manaraka ireto:
- Halavany voalohany: 18-30bp.
- GC afa-po: 40-60%.
- Sanda Tm: Ny lozisialy fandrafetana voalohany, toy ny Primer 5, dia afaka manome ny sanda Tm an'ny primer.Tokony ho akaiky araka izay azo atao ny sandan'ny Tm an'ny primer ambony sy ambany.Azo ampiasaina koa ny raikipohy kajy Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Rehefa manao PCR, ny mari-pana eo ambanin'ny sandan'ny Tm voalohany amin'ny 5 °C dia voafantina amin'ny ankapobeny ho mari-pana fanalefahana (ny fitomboana mifanaraka amin'ny mari-pana fanalefahana dia mety hampitombo ny fahasamihafan'ny fihetsiky ny PCR).
- Primers sy PCR vokatra:
- Ny halavan'ny vokatra fanamafisam-peo PCR voalohany indrindra dia 100-150bp.
- Ny famolavolana primers ao amin'ny faritra ara-drafitra faharoa amin'ny môdely dia tokony hohalavirina araka izay azo atao.
- Halaviro ny fiforonan'ny fototra mifameno 2 na mihoatra eo anelanelan'ny tendrony 3′ amin'ireo primera ambony sy ambany.
- Primer 3′ terminal base dia tsy afaka manatrika miaraka amin'ny 3 fanampiny G na C misesy.
- Ny primer dia tsy afaka manana rafitra mifameno, raha tsy izany dia hiforona ny firafitry ny volo, izay misy fiantraikany amin'ny fanamafisana ny PCR.
- Ny ATCG dia tokony hozaraina araka izay azo atao amin'ny filaharana voalohany, ary ny tobin'ny terminal 3' dia tokony hohalavirina toy ny T.
Fanazavana fanampiny1:Cell DirectRT-qPCR Kit component fonosana fanampiny
1. Vahaolana Lysis Cell
| Cell Lysis Solution | |||
| Kit singa (système lysis / lavadrano 24) | Ampahany DRT-01011-A1 | Ampahany DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| anjaraaho | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| anjaraII | ADN Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
| RT Mix | |
| Kit singa (Rafitra fanehoan-kevitra 20 μl) | Ampahany DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direct RT Mix | 800 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1,7 ml × 2 |
| qPCR Mix | ||
| Kit singa (Rafitra fanehoan-kevitra 20 μl) | Ampahany DRT-01021-C1 | Ampahany DRT-01021-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| 20 × ROX Reference Fandokoana | 40 μl | 200 μl |
| RNase-Free ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Boky torolalana:
