Kit RT-qPCR mivantana III
Kit Description:
◮Kit RT-qPCR mivantana, mampiasa Foreasy Reverse Transcriptase sy Foreasy HS Taq DNA Polymerase novolavolain'i Foregene, miaraka amin'ny buffer fanehoan-kevitra tsy manam-paharoa, mahatonga ity kitapo ity manana fanoherana matanjaka sy mifanentana, ary afaka manandrana mivantana ny fampiasana ny rafitra Foregene Lysis ho modely.Ity kitapo ity dia azo ampiharina amin'ny kitapo fitiliana asidra nokleika COVID-19 sy ny fivoaran'ny kitapo fitiliana asidra nokleika hafa.
Description
Kit RT-qPCR mivantana dia manome buffer RT-qPCR misaraka (miaraka amin'ny polymerase ADN Foreasy HS Taq mifangaro) ary mahomby.Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),mahatonga azy io ho mora amin'ny famoronana kitapo back-end sy fanitsiana rafitra, ao anatin'ny fanamarinana tsotra.
Kit RT-qPCR mivantana, mampiasa Foreasy Reverse Transcriptase sy Foreasy HS Taq DNA Polymerase novolavolain'i Foregene, miaraka amin'ny buffer fanehoan-kevitra tsy manam-paharoa, mahatonga ity kitapo ity manana fanoherana matanjaka sy mifanentana, ary afaka manandrana mivantana ny fampiasana ny rafitra Foregene Lysis ho modely.Ity kitapo ity dia azo ampiharina amin'ny kitapo fitiliana asidra nokleika COVID-19 sy ny fivoaran'ny kitapo fitiliana asidra nokleika hafa.
Ity kitapo ity dia mety ho singa mivantana amin'ny vokatra IVD, mora ampiasaina sy haingana.Mila fanamarinana mora fotsiny izy io, tsy misy fivoarana indray.
fepetra arahana
500T, 50.000T
Kit singa
| Ny votoatin'ny kitapo (Rafitra fanehoan-kevitra 20 μL) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Foreasy Reverse Transcriptase(200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 mL×5 |
| 2× qPCR mivantanaMix-Taqman | 1 mL × 5 | 500 mL×1 |
| TOROMARIKA | 1 | 1 |
Dingana fiasana
A: Manomana ny môdely sy ny reagent
1. Omano ny môdely RNA voaomana (Azo ampiasaina ny kitapo andiany Foregene Total RNA Isolation Kit mba hanesorana sy hanadiovana ny môdely RNA) na santionany amin'ny vokatra famakivakiana (Azo ampiasaina ny rafitra Foregene Lysis), primer manokana (10 μM) ary fitaovana hafa ilaina, fitaovana.
2. Apetraho ao anaty boaty misy ranomandry ny 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O ary 20× ROX Reference Dye (raha ilaina izany), mba hiempo ho azy ireo, ary afangaro moramora.
B: Manomana rafitra RT-qPCR
Raiso ny antsasaky ny habetsaky ny fanehoan-kevitra buffer amin'ny rafitra fanehoan-kevitra (ohatra, raha 20 μL ny habetsaky ny rafitra dia mila mahazo 10 μL 2 × Direct RT-qPCR Buffer.). HO AN'NYmifanaraka amin'ny habetsahan'ny anzima,manolotra izany izahayM-MLV: 10-30 U/20 μL rafitra fanehoan-kevitra,TaqADN polymerase：1-2 U/20 μL rafitra fanehoan-kevitraIty no soso-kevitray, tokony hizaha toetra sy hanitsy izany ianao), ampio ny môdely RNA, primer sy probe manokana, ary ampio RNase-Free ddH2O hatramin'ny 20 μL.Ny fanomanana manokana ny rafitra fanehoan-kevitra RT-qPCR dia azo lazaina amin'ny tabilao manaraka 1.
Tabilao 1: Manomana ny rafitra RT-qPCR
| singa fototra | BOKY FAHA- | fifantohana farany |
| 2× Direct RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Primer mandroso (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
| Primer mivadika (10 μM) | 0,8 μl | 50-900nM |
| Probe (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Template(RNA na Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX Reference Fandokoana | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Volume total | 20 μL |
Fanamarihana: Forward Primer sy Reverse Primer dia primer manokana amin'ny fototarazo kendrena.Ny rafitry ny qPCR dia azo amboarina araka ny maodely andrana sy PCR azo ampiharina.Manoro hevitra 400nM izahay ho an'ny fifantohana farany amin'ny ankamaroan'ny primers.Ampifanaraho amin'ny fifantohana efa nomanina sy ny fifantohana farany atolotra, azafady, ny habetsaky ny primer sy probes manokana.
1 *: Misafidiana fifantohana farany mety amin'ny ROX Reference Dye araka ny fitaovana PCR isan-karazany.Ny fifantohana ROX Reference Dye tsara indrindra amin'ny fitaovana PCR mahazatra dia aseho amin'ny tabilao manaraka:
| Fitaovana PCR quantitative | Ny fifantohana farany amin'ny ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/dingana voalohany,Sns | 1 × (ohatra, ampio 1μl 20 × ROX Reference Dye amin'ny rafitra fanehoan-kevitra 20 μL) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P ary Mx4000, sns. | 0.5 × (ohatra, ampio 0.5μl 20 × ROX Reference Dye amin'ny rafitra fanehoan-kevitra 20 μL) |
| Roche PCR fitaovana, Bio-Rad PCR fitaovana, Eppendorf quantitative PCR fitaovana, sns. | Tsy misy ROX Reference Dye |
Fitehirizana sy ny fiainana talantalana
Ny kitapo dia tokony hotehirizina amin'ny -20 ± 5 ℃.Tokony hotehirizina avy hatrany ao amin'ny vata fampangatsiahana thermostatic -20 ℃.Ny fe-potoana manan-kery dia 2 taona raha tehirizina amin'ny toe-javatra mety.
